植物凝脂酸(PA)ELISA试剂盒能否用于体外定量检测血清、血浆或其他相关生物液体中浓度? ¹

检测原理与方法是否相同？

植物凝脂酸(PA)ELISA试剂盒的检测原理是采用双抗体夹心ELISA法。该方法利用酶标板上的抗体包被，样品或标准品中的抗原与包被抗体结合，洗去游离的成分。然后依次加入生物素化的抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，形成免疫复合物。加入显色底物后，通过测量OD值计算出样品中指标的浓度。

如何进行操作步骤？

1. 加样：在标准品孔和样本孔中加入不同浓度的标准品和待测样品。

2. 加酶：每孔加入酶标试剂。

3. 温育：将酶标板置于37℃温育60分钟。

4. 洗涤：使用稀释后的洗涤液进行洗涤。

5. 显色：加入显色剂A和显色剂B进行显色。

6. 终止：加入终止液终止反应。

7. 测定：使用酶标仪在450nm波长下测量各孔的吸光度。

需要准备哪些物品？

1. 酶标仪(450nm波长滤光片)

2. 高精度移液器，EP管及一次性吸头：0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL

3. 37℃恒温箱，双蒸水或去离子水

4. 吸水纸

主要参考文献

[1] 吕雪飞 周晓萍 满燕 张经华 王鹏举 刘洋. 定量检测转基因植物蛋白Cry1Ac的双抗体夹心ELISA方法建立。《现代食品科技》 2014年第10期257-262。