目的:想要制备双抗体夹心ELISA的酶标板
方法:PH9.6碳酸盐缓冲液稀释抗体,约10ug/ml,4度过夜
疑惑:1、怎么样才能确定抗体包被在了酶标板上? 2、怎么设置组别?
空白组:不用抗体包被,只有:抗体稀释液+封闭+洗涤液+酶标抗体+显色液+终止液
阴性组:抗体包被,有:抗体+抗体稀释液+PBS+封闭+洗涤液+酶标抗体+显色液+终止液
阳性组:抗体包被,有:抗体+抗体稀释液+目的蛋白+PBS+封闭+酶标抗体+洗涤液+显色液+终止液
我理解着,空白组排除了试剂颜色的干扰,与阴性组相比存在较大差异是不是就说明了抗体包被上去了?
还有一种理解方式就是:包被了抗体(自制鼠源性的)+抗属的酶标抗体检测——吸光值达到什么样的程度可以说明包被上去了?与板孔的吸光值吗?