3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPD)是糖代谢的中心环节,对糖代谢起着重要的作用。它能够催化3-磷酸甘油醛的氧化和磷酸化反应,生成1,3-二磷酸甘油酸。该酶广泛分布于人体各组织器官,尤其在骨骼肌、红细胞和肾中含量最为丰富。一些疾病如急性肝炎、酒精性肝病、肝硬变、慢性肾盂肾炎、多发性骨髓病、肺炎和肺气肿等会导致血清GAPD总活性的升高。因此,通过检测3-磷酸甘油醛脱氢酶的活性,可以推断是否患有这些疾病,对疾病的预防和治疗具有重要意义。
一项专利CN201711376257.7提供了一种制备3-磷酸甘油醛脱氢酶及其多克隆抗体的方法。该方法利用来源于细菌的3-磷酸甘油醛脱氢酶,具有低温酶的特性。通过免疫小鼠制备抗血清,并纯化抗血清得到3-磷酸甘油醛脱氢酶的多克隆抗体。此外,该专利还提供了3-磷酸甘油醛脱氢酶的氨基酸序列和编码基因的碱基序列。通过PCR技术扩增碱基序列,并将其克隆入载体质粒中,构建3-磷酸甘油醛脱氢酶的表达载体。最后,将表达载体转化入大肠杆菌感受态菌体中,经过培养、诱导表达、收集菌体、破碎菌体和纯化蛋白的过程,得到3-磷酸甘油醛脱氢酶蛋白。
[1] CN201711376257.7 3-磷酸甘油醛脱氢酶及其多克隆抗体