免疫细胞无血清培养基的优势和应用？ ¹

免疫细胞无血清培养基是一种用于体外诱导和扩增脐带血或外周血中分离的单核细胞向CIK细胞进行培养的培养基。

免疫细胞无血清培养基的特点

1、不含血清和细胞因子的培养基。

2、不含异源动物成分，化学成分经过限定的培养基。

3、具有优越的培养性能，支持高密度单核细胞的培养。

免疫细胞无血清培养基的应用

1、长期增殖培养DC细胞、CIK细胞和NK细胞。

2、长期增殖培养PBL细胞和TIL细胞。

3、长期增殖培养单核细胞和巨噬细胞。

4、长期增殖培养T淋巴细胞。

免疫细胞无血清培养基的使用方法

1、采集和分离外周血，使用Ficoll密度梯度离心法分离并收集单核细胞。

2、接种和诱导活化单核细胞
1) 在0天时，计数细胞并按照细胞密度2x10⁶cell/mL接种到相应体积的培养液中。添加YC001诱导因子和10%自体血浆。
2) 在1天时（24小时），向已接种细胞的培养液中添加YC002、YC003和YC004诱导因子。将YC005添加到未使用的培养基中备用。

3、连续培养和扩增细胞
1) 在3天时，添加新鲜培养液，将细胞密度调整至(0.6-0.8)x10⁶cell/mL。同时添加新加入培养液体积的10%自体血浆。补液比例大致为1：2（原有培养液体积：新加培养液体积）。
2) 在5天时，添加新鲜培养液，将细胞密度调整至(0.6-0.8)x10⁶cell/mL。补液比例大致为1：3。
3) 在7天时，添加新鲜培养液，将细胞密度调整至(0.6-0.8)x10⁶cell/mL。补液比例大致为1：2。
4) 在9天时，将剩余的培养液全部加入。

4、收获细胞
在培养周期结束后，根据细胞数量收获细胞。

主要参考文献

[1] 孙婧、陈红松、高燕、王松霞、张毅、王宇；无血清培养基与完全培养基对体外诱导免疫细胞支持作用的比较。中国肿瘤生物治疗杂志。