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circRNA FISH试剂盒的优势及应用领域是什么? 1

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circRNA FISH试剂盒是一种新的原位杂交方法,采用荧光标记取代同位素标记,具有安全、快速、灵敏度高、探针保存时间长、能同时显示多种颜色等优点。circRNA具有闭合环状结构,存在于真核生物细胞质内,参与了调控miRNA及其他类型RNA、蛋白质活性及功能等。circRNA的亚细胞位置上也呈多样化,在细胞核、细胞质和细胞器均有分布,甚至某些circRNA具有独特的亚细胞位置,有可能是全新的亚细胞构成。

circRNA FISH试剂盒可用于肿瘤的发生、发展和诊断的研究。circRNA通过拮抗miRNA来调控靶基因表达,与多种疾病有着密切联系,特别是在肿瘤中发挥重要作用。例如在妇科恶性肿瘤中的研究中,circRNA可以通过多种调控方式影响基因表达,例如可负性调控miRNA表达,也可与蛋白质结合调控基因表达,或可作为相应疾病的诊断标志物或潜在治疗靶点。

circRNA FISH试剂盒的特点:

1、安全、快速、重复性好;

2、特异性100%,灵敏度超过90%;

3、探针性能稳定,低温保存一年以上;

4、荧光信号强,结果判定直观可靠;

5、操作简单,定位精准,无实验污染。

circRNA FISH试剂盒的优势:

1.准确性:针对circRNA拼接位点,设计跨接头引物,即便在相应线性RNA存在的情况下也能特异性检测circRNA,使circRNA的检测准确可靠;

2.特异性:每一对特异引物都经过实验验证,熔解曲线都呈单峰,电泳条带均呈单一条带,扩增产物大小与目的基因相符;

3.专业性:每对circRNA引物均由有着多年circRNA研究经验的专业人员进行设计,并通过实验严格验证引物的特异性,保证研究结果的可靠性;

4.可定制:“circRNA引物库”已验证特异性引物达到20000多对,用户可自由定制,灵活选择,大大节约研究时间。

RIP实验是基于蛋白研究RNA-蛋白相互作用的技术,适合体内研究。

实验流程:

1.细胞裂解

2.捕获RNA-蛋白复合物

3.洗脱

4.检测

参考文献

[1]Cancer incidence and mortality worldwide:Sources,methods and major patterns in GLOBOCAN 2012[J].Jacques Ferlay,Isabelle Soerjomataram,Rajesh Dikshit,Sultan Eser,Colin Mathers,Marise Rebelo,Donald Maxwell Parkin,David Forman,Freddie Bray.Int.J.Cancer.2015(5)

[2]Genome-wide Analysis of Drosophila Circular RNAs Reveals Their Structural and Sequence Properties and Age-Dependent Neural Accumulation[J].Jakub O.Westholm,Pedro Miura,Sara Olson,Sol Shenker,Brian Joseph,Piero Sanfilippo,Susan E.Celniker,Brenton R.Graveley,Eric C.Lai.Cell Reports.2014(5)

[3]The relation between endometriosis and ovarian cancer–a review[J].Lene N.Heidemann,Dorthe Hartwell,Christian H.Heidemann,Kirsten M.Jochumsen.Acta Obstet Gynecol Scand.2014(1)

[4]PABPN 1:molecular function and muscle disease[J].Ayan Banerjee,Luciano H.Apponi,Grace K.Pavlath,Anita H.Corbett.FEBS J.2013(17)

[5]MicroRNA-497 is a potential prognostic marker in human cervical cancer and functions as a tumor suppressor by targeting the insulin-like growth factor 1 receptor[J].Min Luo,Dongxiang Shen,Xiaoning Zhou,Xiaodong Chen,Wei Wang.Surgery.2013(6)

[6]康川川,赖凤娣,徐玲,钟佳宁,钟田雨,谢晓英.circRNA在妇科恶性肿瘤中的研究进展[J].赣南医学院学报,2018,38(12):1264-1268.

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