人Alpha1Beta糖蛋白(Alpha1Beta-GP)ELISA KIT是一种用于检测该指标的试剂盒。该试剂盒使用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体。在微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体和HRP标记的亲和素。经过洗涤后，使用底物TMB进行显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，然后在酸的作用下转化成黄色。样品中该指标的浓度与颜色的深浅呈正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，可以计算样品的浓度。
糖蛋白是一种含有寡糖链的蛋白质，两者之间以共价键相连。寡糖链通常是通过共转译修饰或后转译修饰过程中的糖基化作用连接在蛋白质上。
糖蛋白多肽链通常携带许多短的杂糖链，包括N-乙酰己糠胺和己糖。这些链末端常常是唾液酸或L-岩藻糖。寡糖链通常分支，含有2-10个单体，分子量在540-3,200之间。糖链的数目也有很大的变化。
糖蛋白在动植物中较为常见，尤其在脊柱动物中丰富。它们在金属转运蛋白、血铜蓝蛋白、凝血因子、补体系统、激素、促卵泡素、RNase、膜结合蛋白和主要组织相容性抗原等方面起着重要作用。大多数糖蛋白的寡糖链是其功能中心。
人类基因组计划的完成使得人类功能基因的研究成为可能。Alpha1-B糖蛋白是一种在人血浆中分离的蛋白质，其前体基因已经被克隆出来。通过研究该基因的表达谱和调控，推测Alpha1-B糖蛋白可能参与肝再生过程，促进肝细胞增殖。
由于从血浆中分离纯化Alpha1-B糖蛋白很困难，利用毕赤酵母表达系统也未能获得高效的表达。因此，利用DNA重组技术，在原核细胞中表达Alpha1-B糖蛋白，并观察其对细胞增殖的影响。同时，重组Alpha1-B糖蛋白的表达为制备抗体、获得下游蛋白以及研究蛋白质间相互作用奠定了基础。
实验中，通过PCR扩增Alpha1-B糖蛋白前体基因，构建重组原核表达载体，并转化宿主菌。诱导表达Alpha1-B糖蛋白后，提取、纯化和复性包涵体蛋白，通过Western印迹鉴定。使用流式细胞仪和MTT方法检测分析重组Alpha1-B糖蛋白对细胞增殖的影响。
[1] 李孟森, 周升海. 甲胎蛋白维持肝癌细胞恶性增生的作用机制[J]. 国外医学(肿瘤学分册). 2003(06)
[2] 王涛, 周先碗, 胡美浩. 人尿激酶原在大肠杆菌中表达的研究[J]. 北京大学学报(自然科学版). 2000(06)
[3] Graeme J.Gowans, Simon A.Hawley, Fiona A.Ross, D.Grahame Hardie. AMP Is a True Physiological Regulator of AMP-Activated Protein Kinase by Both Allosteric Activation and Enhancing Net Phosphorylation[J]. Cell Metabolism. 2013(4)
[4] Ahmet Sert, Ozgur Pirgon, Ebru Aypar, Hakan Yilmaz, Dursun Odabas. Subclinical Hypothyroidism as a Risk Factor for the Development of Cardiovascular Disease in Obese Adolescents With Nonalcoholic Fatty Liver Disease[J]. Pediatric Cardiology. 2013(5)
[5] 聂栋. Alpha1-B糖蛋白前体基因的原核表达及功能鉴定与CYP4F2基因的肾脏靶向表达[D]. 中国医科大学, 2005.
1
