为了降低污染并保证质量的稳定,我们可以使用小鼠气管和支气管上皮细胞培养试剂盒来优化目的细胞的生长条件。这种培养方法可以保持细胞的分化状态,并且可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
形态:贴壁
细胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
传代方法:首次建议1:2-1:3 两天换液一次
冻存条件:90%FBS+10%DMSO
1. 从动物胚胎或者一些刚出生的动物的器官或者组织上取得细胞,配制成细胞悬浮液。将细胞液放到培养瓶中,在培养箱里进行原代培养。
然而,需要注意的是,细胞在瓶壁上生长时,如果大量增殖,细胞之间会相碰,从而停止分裂增殖,出现接触抑制现象。
2. 为了让细胞继续增殖,我们可以使用胰蛋白酶将其分开,然后配制成细胞悬浮液,分装到多个瓶子中进行传代培养。
该细胞可以用于研究与p53相关的长链非编码RNA在放射损伤反应中的作用机制。通过使用CRISPR-Cas9基因编辑技术构建p53敲除的人支气管上皮细胞,我们可以检测P53表达水平,并通过lncRNA芯片和实时定量RT-PCR分析来研究lncRNA的表达谱和生物学功能。
研究结果显示,与野生型细胞相比,敲除p53的细胞在照射后表达239条上调的lncRNA和287条下调的lncRNA。生物信息学分析表明,这些差异表达的lncRNA的靶基因涉及多种分子功能,如β3肾上腺素受体结合蛋白、酪氨酸激酶活性蛋白、DNA结合蛋白等。