导数分光光度法通过对吸收曲线进行微分处理,得到吸光度对波长的变化率曲线,即导数吸收光谱。
微分处理实质上是测定吸收曲线在整个区域内的斜率。吸收曲线上的最大吸收对应于偶数阶导数光谱的极值,而在奇数阶导数光谱中则对应于零。导数阶数的增加使吸收带宽变窄,峰形变锐,从而提高了光谱的分辨率。
导数分光光度法在分析混浊试样、微量成分的检测、样品纯度的检验、背景扣除以及多组分混合物重叠光谱的分离与测定等方面具有特殊的作用。
导数光谱可利用双波长分光光度计测得,也可以用电学方法获得,且能得到较高阶的导数吸收光谱。
导数吸收光谱可以很方便地区分一般吸收光谱上的肩峰或相互重叠的吸收峰,从而简化了光谱解析。
导数分光光度法在定量分析方面,尤其是对混合物的定量具有独特的优越性。在特定波长下,导数值与被测组分的浓度呈线性关系,可以通过切线法或峰-谷法计算组分的含量。
例如,用导数分光光度法可以轻松检测乙醇中微量的苯。导数分光光度法的灵敏度比一般分光光度法更高。