如何利用转录方法合成ShRNAs? ¹

转录方法是一种合成ShRNAs的有效途径，它模拟了生物体内RNA的合成过程，可以得到与自然状态中的dsRNA最接近的ShRNAs，从而实现更好的RNA干扰效果。与化学合成相比，体外转录合成ShRNAs具有成本低、质量高、毒性小和稳定性好的优势。

转录ShRNAs只需较低浓度即可达到化学合成ShRNAs较高浓度的效果，并且直接使用dsRNA易于转染，非常有效，适用范围广泛。然而，由于哺乳动物中不存在RNAi的扩增机制，导入RNA产生的RNAi作用具有瞬时性。为了克服这个弱点，已经发展了一种基于DNA载体在体内表达siRNA的技术，即编码ShRNA的转录DNAs法。

ShRNAs的应用领域是什么？

ShRNAs可以用于非编码RNA克隆分析及其功能初步研究。非编码RNA是一类不编码蛋白质的RNA分子，与已知的mRNA、rRNA和tRNA不同，它们不直接参与蛋白质的合成。非编码RNA在各种生物中广泛存在，包括类mRNA RNA、microRNA(miRNA)、snRNA、snoRNA、scRNA、pRNA、SRP-RNA、gRNA等。非编码RNA可以影响转录和染色质的结构，参与RNA的加工修饰，调节mRNA的稳定性和翻译，还可以影响蛋白质的稳定和转运。

ncRNA通过多种机制发挥作用，例如RNA-RNA(DNA)碱基配对、RNA-蛋白质相互作用、模拟其他核酸分子或直接起催化作用。microRNA和类mRNA RNA是两类非常重要的非编码RNA分子，已有研究结果表明它们与细胞的生长和分化、胚胎的发育、肿瘤的形成和抑制密切相关。本文对这两种非编码RNA分别在发育、肿瘤及衰老过程中的作用进行了初步研究。

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