随着细胞治疗和基因治疗技术的不断发展,细胞的相关研究已经逐渐成为当前医学乃至整个生命科学领域中的研究热点,细胞培养已经成为科研中一个很重要的技术,而要获得较纯的目的细胞,流式细胞分选、纯化已成为关键的问题。
流式细胞分选是一种将特定细胞从混合细胞样品中分离出来的技术。通过使用抗体标记细胞,并利用萤光标记、免疫磁珠等特性来实现细胞的分离。
细胞的分选是通过分离含有单个细胞的液滴来实现的。在流动室的喷口上配有超高频电晶体,通过充电和振动使液流断裂为均匀的液滴,待测定细胞分散在这些液滴中。这些液滴带有不同的电荷,在高压电场的作用下偏转并落入各自的收集容器中,从而实现细胞的分离。
1、如何利用流式细胞分选技术分离肿瘤干细胞?
肿瘤干细胞是肿瘤中具有自我更新、无限增殖及多向分化潜能的细胞。虽然这部分细胞只占少部分,但在肿瘤的发生、演进、复发耐药以及逃逸免疫系统的识别和清除过程中可能发挥了至关重要的作用。
2、如何利用流式细胞分选技术分离外周血细胞?
基于流式细胞仪的分选功能,可以根据细胞的大小和颗粒度等特征,直接分离白细胞并获取人体外周血中的单核细胞。这种方法既避免了多次重复离心,又能够获得纯度在80%-90%之间的单核细胞,为深入研究单核细胞提供了良好的技术平台。
3、如何利用流式细胞分选技术分离染色体?
通过流式分选的方法可以得到高质量的单个染色体,这种方法可以同时纯化大量染色体,为后续的试验如植物基因组测序等提供了方便。
4、如何利用流式细胞分选技术分离造血干细胞?
通过配制HSCs体外培养液并结合流式细胞分选技术,可以建立一种在体外不需要基质细胞支持的稳定高通量培养单个HSC形成血细胞集落的实验方法。
5、如何利用流式细胞分选技术分离神经细胞?
已经建立了一种较为完善的流式细胞仪分选在体模型中神经细胞的技术方法,该分选方法可以同时获得高纯度和大量的不同种类的神经细胞。
[1] 陈少坚 郭风劲;流式细胞分选技术应用的研究进展。《中华实验外科杂志》 2011年 第9期。