人抗心磷脂抗体IGM(ACA-IGM)ELISA试剂盒是一种采用双抗原夹心酶联免疫法（ELISA）测定标本中人抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)的试剂盒。该试剂盒通过将纯化的抗原包被在微孔板上，形成固相抗原，与样品中的抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)结合。经过洗涤去除未结合的抗体和其他成分后，再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物。随后，加入底物TMB进行显色，TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，再在酸的作用下转化成最终的黄色。最后，使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值进行比较，从而判断标本中是否存在人抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)。
1. 血清：将室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
3. 尿液：使用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液的处理方法与此类似。
4. 细胞培养上清：当检测分泌性成分时，使用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。当检测细胞内成分时，使用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，使细胞破坏并释放细胞内成分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS（PH7.4），用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份用于检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后应尽早进行提取，提取方法可参考相关文献。若无法立即进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
7. 不能检测含NaN3的样品，因为NaN3会抑制辣根过氧化物酶（HRP）的活性。
[1] 沈洪远；张健；胡志刚；叶燕。Sm3+标记抗心磷脂抗体IgM时间分辨荧光免疫分析法的建立。中国实验诊断学。
[2] 盛慧明；曹雅楠；孙兵；薛一峰；胡志刚。抗心磷脂抗体IgG和IgM双标记时间分辨荧光免疫分析法的建立和应用。上海医学。
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