重组金黄色葡萄球菌蛋白A抗体的制备及应用研究？ ¹

背景^[1-3]

重组金黄色葡萄球菌蛋白A抗体是一种多克隆抗体，能够特异性结合重组金黄色葡萄球菌蛋白A，并广泛应用于体外免疫学检测。

蛋白A是金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白质，与多种哺乳动物的IgG结合，可用于ELISA试验、组织化学、Western Blot等抗体检测。

金黄色葡萄球菌是一种常见的细菌。

蛋白A与琼脂糖凝胶结合后可制备用于抗体纯化的亲和填料，用于分离和纯化多种哺乳动物不同亚型的抗体或包含抗体Fc片段的基因工程重组蛋白。

重组金黄色葡萄球菌蛋白A抗体制备步骤:

1、制备抗原。

2、选择实验动物。

3、动物免疫。

4、测试免疫效果。

5、采集全部血清。

6、纯化抗体。

7、鉴定抗体的纯度和特异性。

应用^[4][5]

金黄色葡萄球菌蛋白A基因的克隆及应用研究

金黄色葡萄球菌蛋白A（SPA）是一种能与多物种抗体Fc端结合的菌体蛋白，被广泛应用于抗体纯化层析配体的研究。提高SPA的活性和稳定性对于抗体药物的生产至关重要。

通过PCR技术，利用ATCC6538株金黄色葡萄球菌的基因组DNA克隆得到SPA的全长基因，编码501个氨基酸。将SPA的全长蛋白和功能区片段与SUMO标签进行融合表达，提高SPA蛋白的稳定性和活性。

利用ELISA方法对融合蛋白的抗体结合活性和稳定性进行检测，结果显示融合蛋白具有较好的抗体亲和性和稳定性，并成功应用于抗体的纯化。

参考文献

[1]Isolation of a peptide ligand for affinity purification of factor VIII using phage display[J].Brian D.Kelley,James Booth,Molly Tannatt,Qi-Long Wu,Robert Ladner,Jinan Yu,Daniel Potter,Arthur Ley.Journal of Chromatography A.2004(1)

[2]Study of Binding between Protein A and Immunoglobulin G Using a Surface Tension Probe[J].L.Yang,M.E.Biswas,P.Chen.Biophysical Journal.2003(1)

[3]Protein A-induced apoptosis of cancer cells is effected by soluble immune mediators[J].Tanya Das,Gaurisankar Sa,Sreya Chattopadhyay,Prasanta K.Ray.Cancer Immunology,Immunotherapy.2002(7)

[4]Affinity purification of polyclonal antibodies using a new all-D synthetic peptide ligand:comparison with protein A and protein G[J].Antonio Verdoliva,Filomena Pannone,Maria Rossi,Sergio Catello,Vincenzo Manfredi.Journal of Immunological Methods.2002(1)

[5]高学慧.金黄色葡萄球菌（ATCC6538）蛋白A基因的克隆及应用研究[D].东北农业大学,2010.