如何制备FMoc-Val-Cit-PAB-PNP? ¹

FMoc-Val-Cit-PAB-PNP是一种有机中间体，可用于合成多肽偶合物。它可以通过一系列反应步骤从L-缬氨酸和L-瓜氨酸制备而成。

合成步骤

合成化合物H-1

将1.0eq.的Val溶解在10％碳酸钠水溶液中，然后在0℃条件下加入1.1eq.的Fmoc-Cl（溶于1,4-二氧六环）。在此温度下反应1小时后，将反应体系自然升温至室温并反应过夜。反应完全后，将反应液加入水中，进行三次乙醚萃取。将水溶液酸化后，用乙酸乙酯进行三次萃取。最后，在减压条件下除去有机溶液，得到化合物H-1。

合成化合物H-2

将化合物H-1溶解在四氢呋喃溶液中，然后在0℃条件下加入1.1eq.的NHS和1.1eq.的DCC。将反应体系自然升温至室温并反应过夜。反应完全后，过滤除去不溶的DCU，用冷却的四氢呋喃洗涤沉淀，合并有机溶液。最后，在减压条件下除去有机溶液，得到粗品H-2，可直接用于下一步反应。

合成化合物H-3

将1.0eq.的化合物H-2溶解在DME中，然后加入1.1eq.的Cit（溶于碳酸氢钠水溶液）。再加入四氢呋喃以提高溶解度。在常温条件下搅拌16小时后，加入柠檬酸水溶液。然后，用异丙醇/乙酸乙酯体系进行两次萃取。合并有机相后，在减压条件下除去有机溶剂，将得到的固体真空干燥6小时。最后，加入乙醚并进行超声振荡，过滤并干燥，得到化合物H-3。

合成化合物H-4

将1.0eq.的化合物H-3和2.0eq.的对氨基苯甲醇溶解在二氯甲烷和甲醇溶液中（体积比为2:1），然后加入2.0eq.的EEDQ。在避光条件下，保持整个反应体系在常温下反应36小时。然后，在40℃下减压除去有机溶剂。将得到的固体置于乙醚溶液中，进行超声振荡后过滤。冷却乙醚洗涤固体后，得到化合物H-4。

合成化合物H-5

将1.0eq.的化合物H-4和2.0eq.的吡啶溶解在四氢呋喃溶液中。在-40℃、氮气保护的条件下，加入2.0eq.的对硝基苯基氯甲酸酯。然后，将溶液自然升温至室温反应。在搅拌12小时和24小时后，再次冷却至-40℃，补加2.0eq.的吡啶和2.0eq.的对硝基苯基氯甲酸酯。最终，在反应36小时后，加入乙酸乙酯。依次用柠檬酸、水和饱和食盐水洗涤后，用无水硫酸钠干燥有机相。过滤后除去有机溶剂，经过制备色谱柱分离纯化，得到纯品H-5。

参考文献

[1] [中国发明] CN201811154973.5 ODN或衍生物的多肽偶合物及其制备方法和应用