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化学发光是什么现象? 1

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化学发光是物质在进行化学反应过程中伴随的一种光福射现象。一些物质在进行化学反应时,吸收了反应过程中的所产生的化学能,使反应产物分子激发到电子激发态。当电子从激发态的最低振动能级回到基态的各个振动能级时产生福射,多余的能量W光子的形式释放出来,运一现象称为化学发光。

化学发光免疫分析 (chemiluminescence immunoassay ,CLIA),是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。是继放免分析、酶免分析、巧光免疫分析和时间分辨巧光免疫分析之后发展起来的一项最新免疫测定技术。化学发光具有灵敏度高、特异性强、无放射危害等优点。

根据化学发光反应的不同体系和标记物及标记方法的不同,发光免疫分析大体可分为化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析及生物发光免疫分析Ξ种类型。其中化学发光酶免疫技术是用与某一反应的酶来标记抗原或抗体,免疫反应后,加入发光试剂,测定发光体系的发光强度进行抗原或抗体测定。碱性憐酸酶-9,1 0 -二氨叮晚系统就是其中一个重要发展方向。

APS-5可用于碱性磷酸酶标记物的化学发光检测,底物与碱性磷酸酶反应,快速产生持续、高强度化学发光,并具有优越的灵敏度和便捷性。APS-5化学发光底物非常适合测定溶液中碱性磷酸酶活性,且能用于检测任何碱性磷酸酶共轭分子,如ELISA检测抗体等。

如何操作?

1)使用柔和的灯光,间接白炽灯照明优先,直接照射会造成背景值升高;

2)室温下可操作(约1小时100毫升);

3)从包装容器内轻轻倒置(4-5倍)溶液,确保均匀分配前避免剧烈搅拌;

4)将所需用量的溶液分装到新的高密度聚乙烯或聚丙烯塑料容器中,容器应不透明或覆盖铝箔,以防止直接光(日光或人工光);

5)未使用完的产品存储在原包装,2-8oC下,保质期长达1年。

有哪些重要注意事项?

1)捕获抗体和AP标记检测抗体对待测物具有高效价和高特异性;

2)抗体需要滴定,并需要在酶联免疫吸附试验中测定最佳检测灵敏度的最佳浓度;

3)不同的抗体供应商,提供的抗体家系及特异性有所不同;

4)作为化学发光检测的一般规则,捕获抗体可以被稀释1-10μg/mL范围内,标记抗体可以稀释至0.001-0.01μg/mL;

5)其他影响化学发光试剂检测灵敏度的是:微量滴定板的类型(高或低蛋白结合),靶标的效能和用于减少非特异性背景的封闭试剂;

6)抗体孵育和洗涤过程均可在室温下进行(22-35℃)。

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