目前,肌氨酸的检测方法主要包括液相色谱-质谱联用检测法、肌氨酸氧化酶荧光检测法、毛细管电泳电化学发光检测法和肌氨酸氧化酶分光光度检测法。
液相色谱-质谱联用检测法具有高灵敏度、准确度和精密度,但设备昂贵、检测成本高且操作复杂,不适用于临床大样本量检测。
肌氨酸氧化酶荧光检测法和毛细管电泳电化学发光检测法的灵敏度、准确度和精密度略低于液相色谱-质谱联用检测法,但成本较低。然而,这些方法仍需要专门的检测装置和高水平的操作技能。
相比之下,肌氨酸氧化酶分光光度检测法具有低成本、适用于全自动生化分析仪且可满足临床高速大样本量检测的需求。然而,由于以往的色原灵敏度较低,该方法的灵敏度仍无法完全满足临床要求。
在反应过程中,会生成醌亚胺类有色物质,导致吸光度的变化,该变化与肌氨酸浓度成正比。
反应体系中各反应物质的浓度需要控制在一定范围内,包括试剂浓度和样本试剂反应体积比例。
缓冲液的选择可以使用Tris-HCL缓冲液、磷酸盐缓冲液或N-三羟基代甲基-3-氨基丙磺酸缓冲液,并将其调整至适当的pH值。
不同色原所采用的检测主波长不同,但副波长均为700nm。
最佳反应温度为30-40°C,反应时间控制在8-10分钟。