我这边最近在做硝基还原酶还原4-硝基苯酚的实验 可是总是没办法还原
文献中的方法:NADH 硝基还原酶 4-硝基苯酚 37°C ph.7.4 一小时内就会还原
我这边用的是500μmol NADH;20μg/ml 硝基还原酶;50μmol 4-硝基苯酚;1X的ph=7.4的PBS 在37°C 反应了一天 HPLC检测 我手里有4-氨基苯酚的标样
可是跑HPLC的时候发现原料峰没有明显降低 标样前后保留时间有两个小峰即使会是产物 产率也不超过10%
请问问题会出在什么地方?
NADH是现用现配的 不过就是国产源叶生物的 酶是S-A的用PBS分装 -20冻存 硝基苯酚是安耐吉买的
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