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为什么文献中的引物blast后能出来目的基因有且仅有一条,但是中间会有3-4个左右不配对?

很奇怪,不知道大家有没有发现这个规律,甚至nature,cancer的文章的引物也这样,很不理解。希望大家能够见仁见智的说一下自己的看法。是他们写文章时故意改错几个,还是就是设计引物的时候就要让他有几个不配对?仅有几个不配对不会影响P出目的产物的么?难道这样效果更好?

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3'端一般不会有错配(ARMS等除外),而5‘端或者中间的错配不会对扩增产物有关键的影响,但会影响PCR扩增的难易程度。    
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