感谢大哥们看我的帖子。
我需要用
液质联用的方法对苦荞麦进行成分分析。因为学院这边没有条件做液质,所以老师建议我先做
液相色谱,把液质联用的前处理方法、色谱条件摸清楚,到时候再送出去检测机构做。目前暂时找不到苦荞麦液质联用的文献,所以无法直接参考。我总结了一些植物样品做液质联用的前处理方法,做了一份苦荞麦液相的具体方案。各位色谱大神路过帮忙看看哈
苦荞麦HPLC具体方案:
精密称取液氮研磨后的样品粉末各200 mg 置于10 mL 离心管中,加入6mL40%甲醇,旋涡震荡1min,置于超声机里冰温(保持室温)800W、30min,取出后置于
离心机中13000r/min进行离心15min,离心后过0.45μm滤膜,待用。
色谱条件:
流动相:乙腈—水—0.1%甲酸体系,柱温:30℃,进样2μL,流速0.4mL/min
时间/min:0 2 8 17 26 27 30
流速:0.4mL/min
乙腈%:0 2 12 15 60 100 2
甲酸超纯水%:100 98 88 85 65 0 98
检测波长 260nm
色谱图如下:
7f54d79c8f6cdaff1793b16d7154ecb.png
http://muchongimg.xmcimg.com/oss2/img/2019/0311/w337h12911047_1552288301_566.png
现在我的困惑是:苦荞麦前处理方法和色谱条件的问题出在哪,梯度洗脱方法应该怎么确定,该如何进行改进?
各位老师,帮帮小弟吧,导师对这方面不熟悉,所以我现在很委屈无助,硕士不知道能不能毕业了
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