末端转移酶（Terminal Deoxyribonucleotidyl Transferase，TdT）是一种从动物（通常是牛）胸腺和骨髓中提取的酶。它是一种不依赖于模板的DNA聚合酶，能够催化脱氧核苷酸结合到DNA分子的3'羟基端。TdT可以作用于带有突出、凹陷或平滑末端的单双链DNA分子，加尾长度可达5~300nt。该酶的分子量为58.3 kDa，不具备5'和3'核酸外切酶活性，但在反应中加入Co2+可以提高加尾效率。TdT广泛应用于DNA的3'末端添加同聚物、利用修饰碱基（如ddNTP，DIGdUTP）标记DNA 3'末端以及TdT介导的dUTP缺口末端标记技术（用于细胞凋亡的原位检测）等实验。该酶经检测无DNA内切酶和外切酶污染，也不含RNase。
研究表明，末端转移酶法（TdT法）可以用于研究抗肿瘤药物诱导的肿瘤细胞凋亡。在卡铂治疗的卵巢癌患者的肿瘤组织中，应用TdT法观察到了凋亡细胞。TdT法有可能用于检测经化疗诱导的肿瘤细胞凋亡，并评价治疗过程中肿瘤细胞对治疗的反应。具体应用包括：
(1) 给载体或cDNA加上互补的同聚尾。在建立cDNA文库时，这种加尾方法是常用的。
(2) 用于DNA片段3'末端的放射性核素标记。末端转移酶可以在Mg2+存在的条件下，选择3'-OH端单链DNA为引物加入核苷酸，或者在Co+存在的条件下，选择3'-OH端双链DNA为引物加入核苷酸，从而形成多聚核苷酸尾。如果在反应系统中加入核素标记的核苷酸，就可以得到3'端标记的DNA分子。这种方法常用于核酸末端标记和核酸连接的互补多聚尾。
活性定义为在37℃、60分钟内，催化1nmol dNTP加入到多聚核苷酸3'羟基末端中所需的酶量，定义为1个活性单位。TdT的缓冲液为100mM KCl，30mM Tris-acera，0.05% (v/v) Triton X-100，在25℃时的pH值为7.5。
末端转移酶可以在-20℃下保存3年。
将末端转移酶在75℃下加热20分钟，即可使其失活。
1、适量的EDTA会导致末端转移酶的活性丧失。
2、金属离子螯合剂、较高浓度的铵根离子、氯离子、碘离子和磷酸根离子都会对末端转移酶的活性产生抑制作用。
[1] 童彤, 孙含笑, 刘丽影, 等. 应用末端脱氧核苷酰转移酶法研究化疗药诱导人肿瘤细胞的凋亡[D]. , 1997.
1
