STBL3超级感受态细胞的特性和应用？ ¹

STBL3超级感受态细胞是专为克隆慢病毒表达载体系统中的顺向重复序列而设计的菌株。与其他菌株相比，STBL3菌株能够降低慢病毒和其他反转录病毒长片段末端重复区意外重组的频率。此外，STBL3菌株比SURE细胞更稳定，能够提高慢病毒载体的克隆效率。

STBL3超级感受态细胞是操作慢病毒系统推荐使用的菌株，对慢病毒载体等较大的质粒转化的效果好，能有效减低错误重组的可能性。

如何操作STBL3超级感受态细胞

1.从-80℃取出STBL3感受态细胞，迅速插入冰中，待菌块融化后加入目的DNA（质粒或连接产物），轻轻混匀。

2.将混合物置于42℃水浴中热激45秒，然后迅速放回冰上静置2分钟。

3.向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基。

4.在37℃，225 rpm条件下复苏60分钟或30℃，225 rpm条件下复苏90分钟。

5.离心收菌，留取上清液并涂布到含相应抗生素的培养基上。

6.将培养皿倒置放于37℃或30℃培养箱过夜培养。

STBL3超级感受态细胞的应用

用于E.coli高效感受态细胞转化体系的建立及诱导型瞬时表达载体的构建研究

该研究比较了不同方法制备的大肠杆菌感受态细胞的转化效率，并优化了质粒DNA转化感受态细胞的转化体系。结果表明，应用高效法制备的感受态细胞其转化效率极显著高于普通大肠杆菌感受态细胞，转化效率提高了966.1%。此外，通过调整温度和转化时间，还能进一步提高转化效率。

另外，该研究还构建了诱导型植物瞬时表达载体，并成功将其转化到大肠杆菌感受态细胞中。

参考文献

[1]Marker-assisted introgression of 4 Phytophthora capsici resistance QTL alleles into a bell pepper line:validation of additive and epistatic effects[J].A.Thabuis,A.Palloix,B.Servin,A.M.Daubèze,P.Signoret,F.Hospital,V.Lefebvre.Molecular Breeding.2004(1)

[2]Elicitation of peroxidase activity and lignin biosynthesis in pepper suspension cells by Phytophthora capsici[J].Catalina Egea,Ahmed Sid Ahmed,Milagros Candela,Maria Emilia Candela.Journal of Plant Physiology.2001(2)

[3]Construction of a yeast artificial chromosome library of pepper（Capsicum annuum L.）and identification of clones from the Bs2 resistance locus[J].T.Tai,B.J.Staskawicz.TAG Theoretical and Applied Genetics.2000(1)

[4]Effects of irrigation method on chile pepper yield and Phytophthora root rot incidence[J].Jinhui Xie,Elsa S.Cardenas,Theodore W.Sammis,Marisa M.Wall,Donald L.Lindsey,Leigh W.Murray.Agricultural Water Management.1999(2)

[5]杨坤.E.coli高效感受态细胞转化体系的建立及诱导型瞬时表达载体的构建[D].西北农林科技大学,2010.