实验室准备工作【缓冲液和冲洗液的配制】 1、配制缓冲液 所需物品：去离子水或蒸馏水及sigma tris缓冲粉。 配制主缓冲液： ① 将1包tris缓冲粉(15g)加入1000毫升的去离子水或蒸馏水。 ② 充分混匀溶液，冷藏于（2℃-8℃）。 ③ 记录配制日期，主缓冲液保存期为1个月。 注意事项：用量少的医院，可按以上的比例配制，剩余的缓冲粉要封好，放置干燥地方或冷藏箱。 配制次缓冲液： ① 将45ml主缓冲液加入1000ml去离子水或蒸馏水。 ② 次缓冲液保存于室温，有效期为两周。 2、配制冲洗液 所需物品：无水乙醇（分析纯）、异丙醇（分析纯） 配制：无水乙醇与异丙醇以1：1的比例混合 注意事项：无水乙醇、异丙醇要达到规定的纯度（大于或等于99.7%）,否则影响制片及染色质量。 宫颈系列【标本收集】 1.在宫颈细胞标本保存液瓶上填写病人的姓名、年龄。 2.病人于膀胱截石位，暴露子宫颈。若有血液或白带，先用干棉球试去。 3.用专用的宫颈细胞刷插入宫颈口，顺时针旋转360度，共转5次，用力适中，以保证取得足够数量的组织细胞。 4.将细胞刷头放入标本瓶，并盖好密封。（常温下可保存一个月） 【1】【准备载玻片】(当天处理当天用) 滴加细胞黏附剂至载玻片的标记范围内； 均匀涂抹至完全覆盖载玻片的标记范围； 三种方法干燥： 1、常温干燥60分钟左右,肉眼观察玻片上无液体； 2、放入60℃ 温箱干燥20分钟左右； 3、处理好的玻片常温放置10分钟左右（避免刚涂上去的粘附剂被吹至一边，造成不均的情况），可拿电吹风吹至干燥。玻片一定要完全干燥后才能使用，否则将严重影响细胞的粘附数量。 【2】标本前期处理 标本瓶放震荡器上震荡30秒左右 给标本排序：准确把离心管、申请单用条码、标签对应贴好。 取4ml细胞分离提取液置离心管内 插上注射移液器，放入自动样本转移机转移8ml样本 将离心管平衡放入离心机，第一次离心：程序一（200g 2分钟） 吸去上清液8ml。（余下约4ml） 第二次离心：程序二（800g 10分钟） 将上清液弃掉 震荡细胞块30±15秒，视细胞块大小加减时间，静置10分钟 【3】沉降制片 将涂好细胞粘附剂的玻片放置在制片染色板上，扣上制片染色舱。 注意事项：涂有粘附剂那一面朝上，制片染色舱完全扣在玻片标记范围内 用铅笔在玻片的磨沙范围做条码标记 使用lbp system液基细胞沉降式自动制片染色系统制片、染色 【4】【湿式封片】 拆除制片染色舱，将完成染色的片子放入无水乙醇/异丙醇（密封保存）内的染色架脱水 放入二甲苯内（密封保存）5分钟以上 光学树脂湿式封片 【5】【晾干样片】 将样片置于玻片板上，充分干燥，贴上对应条码 痰液系列【标本收集】 向病人解释认真咳痰对诊断的重要性，请病人清除口内唾液、咽喉分泌物和食物残渣，再从肺部深处用力咳出晨痰至lbp system细胞保存基液专用采样瓶内，旋紧瓶盖；常温下可保存1个月,2℃-10℃保存半年。（一般情况下请于7天内送检）。 如条件允许，请使用雾化生理盐水吸入促进排痰。 【准备载玻片】 见上 【1】贴标签、稀释黏液及混匀样品 在离心管和申请单上贴上对应的标签； 视标本黏液浓度加4.5ml黏液稀释液至标本瓶内； 置于微量震荡器中震荡60分钟左右让标本中黏液充分稀释。 注意事项：肉眼观察黏液需完全稀释方可进行下步操作，如遇黏液较难消化,可添加稀释液或加长振荡时间. 【2】转移样品 将样本瓶、注射移液器相应放入白色标本架上； 将lbp专用过滤器套在离心管管口,放至白色标本架上；开启自动样本转移机转移样本。 【3】集中样品 离心：程序三，﹫600g、10分钟（1800转/分钟）。 注意事项：离心管放置要对称平衡。 【4】清洗、离心 将上清液弃掉；振荡30±5秒 加入5ml缓冲液（清洗细胞） 再次离心：程序四，5分钟、@600g（约1800转/分钟）,将上清液弃掉 震荡细胞块30±15秒，视细胞块大小加减时间，静置10分钟 【5】沉降制片 【6】湿式封片 【7】晾干样片（见上）
