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白屈菜红碱的含量测定方法有哪些? 1

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白屈菜红碱,一种来源于白屈菜植物的生物碱类物质,被广泛应用于抗肿瘤、抗菌等多种药理活性领域,本文将介绍几种常用的白屈菜红碱含量测定方法。


简述:白屈菜红碱(chelerythrine,CHE),又名白屈菜赤碱、白屈菜季铵碱,是从白屈菜、飞龙掌血、博落回、血水草等植物中分离的异喹琳类的苯并菲啶型生物碱。国内外对CHE的药理活性研究表明,其具有抗肿瘤、抗菌、抗炎等多种药理活性,尤其是抗肿瘤活性,关于其诱导细胞凋亡的机制已有学者进行了综述,并证实在体内外对多种肿瘤均具有抑制作用。


含量测定:

1. 液相色谱-串联质谱法

郑国建等人建立了液相色谱-串联质谱技术检测饲料中血根碱和白屈菜红碱含量的分析方法。饲料样品用15 mL、0.2%盐酸乙腈溶液超声提取2次,每次20 min,提取液使用HLB固相萃取柱净化、微孔滤膜过滤后进行液相色谱-串联质谱法测定,用外标法定量,对检测方法进行验证。结果显示:在质量浓度为1~100 ng/mL范围内其线性相关系数≥0.999,定量限为0.005 mg/kg,回收率为91.9%~101%,相对标准偏差为2.00%~7.96%。表明所建立的液相色谱-串联质谱法结果准确、重复性好,适用于饲料中血根碱和白屈菜红碱的测定。


2. 毛细管电泳-电化学发光法

邓光辉等人建立了同时检测博落回果实中血根碱和白屈菜红碱含量的毛细管电泳电致化学发光新方法。该方法应用于博落回果实中血根碱和白屈菜红碱的测定,加标回收率为91%-100.3%。实验方法为:工作电极依次用0.3和0.05μm的Al2O3粉末抛光, 用水冲洗, 再用二次蒸馏水超声清洗干净, 吹干.毛细管使用前依次用0.1mol/L NaOH溶液、二次蒸馏水、运行缓冲溶液[20mmol/L磷酸盐缓冲液 (pH=6.0) -50%乙腈 (体积分数) ]各冲洗10min, 然后将电极与毛细管安装在检测池上, 用光学显微镜调节毛细管与工作电极之间的距离为 (100±5) μm.检测池中添加5 mmol/L Ru (bpy) 32+和65mmol/L PBS (pH=7.8)混合液, 每次实验2h更换新鲜ECL溶液.光电倍增管负高压为800V, 采用8kV×10s电动进样, 施加12kV分离电压进行检测, 所有溶液在进入毛细管前需用0.45μm乙酸纤维素膜过滤。


3. 高效液相色谱法

1)报道一

段树卿等人建立胃痛平胶囊中白屈菜红碱的含量测定方法,采用高效液相色谱法测定胃痛平胶囊中白屈菜红碱的含量,色谱柱为Agilent XDB-C18(4.6 mm×150 mm,2.5μm),流动相为乙腈-1%三乙胺溶液(磷酸调节p H值至3.0)(26∶74),检测波长为269 nm,柱温为25℃,流速为1.0 ml/min,进样体积为10μl。得到白屈菜红碱的线性范围:2.62-43.67μg/ml(r=0.9999),平均加样回收率为98.88%,RSD为1.91%(n=9)。


2)报道二

邹惠亮等人采用HPLC法同时测定不同产地博落回各部位血根碱、白屈菜红碱含量。采用Welch Material XB-C18分析色谱柱(4.6×250 mm,5μm),(A)体积分数为0.1%冰乙酸水溶液-(B)乙腈梯度洗脱(024 min,B的体积分数为10%46%)为流动相,流速为1 m L/min,柱温25℃,检测波长270 nm。在一定质量浓度范围内血根碱、白屈菜红碱含量测定方法的线性关系良好,相关系数分别为0.9997、0.999 3。平均回收率分别为95.6%、95.9%,RSD分别为1.06%、0.6%(n=3)。该方法操作简便、准确、灵敏度高,适合于博落回中血根碱、白屈菜红碱含量的测定



4. 紫外分光光度法

王晓丽等人为测定齐齐哈尔地区白屈菜中白屈菜红碱的含量,采用紫外分光光度法在418nm测定吸光度,并计算白屈菜中白屈菜红碱的含量。结果齐齐哈尔地区白屈菜中白屈菜红碱的含量为0.023%。


参考文献:

[1]郑国建,叶寅颖,雷涛等. 液相色谱-串联质谱法测定饲料中的血根碱和白屈菜红碱 [J/OL]. 饲料工业, 1-9[2024-03-25]. http://kns.cnki.net/kcms/detail/21.1169.s.20240118.1514.021.html.

[2]柳阳,朱艳华,贾婉莹等. 白屈菜红碱脂质体-温敏凝胶的制备及体外释放研究 [J]. 化学工程师, 2019, 33 (03): 83-86. DOI:10.16247/j.cnki.23-1171/tq.20190383.

[3]邓光辉,罗珍连. 毛细管电泳-电化学发光同时测定博落回果实中血根碱和白屈菜红碱的含量 [J]. 分子科学学报, 2018, 34 (02): 134-138. DOI:10.13563/j.cnki.jmolsci.2018.02.009.

[4]段树卿,刘微,尹占芳. 胃痛平胶囊中白屈菜红碱含量的测定方法 [J]. 中国当代医药, 2016, 23 (36): 129-131+141.

[5]邹惠亮,何家希,赵晶晶等. 不同产地博落回各部位血根碱与白屈菜红碱含量分析 [J]. 暨南大学学报(自然科学与医学版), 2015, 36 (04): 290-293.

[6]王晓丽,郭丽娜,孔寰宇等. 齐齐哈尔地区白屈菜中白屈菜红碱的含量测定 [J]. 齐齐哈尔医学院学报, 2014, 35 (16): 2441.

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