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DNA酶1样蛋白1抗体的应用及研究? 1

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背景[1-3]

DNA酶1样蛋白1抗体是一种多克隆抗体,能够特异性结合DNA酶1样蛋白1。该抗体广泛应用于多种免疫学实验,包括Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等。

检测原理

通过双抗体夹心法测定标本中DNA酶1样蛋白1的水平。首先,将纯化的DNA酶1样蛋白1抗体包被在微孔板上,形成固相抗体。然后,依次加入DNA酶1样蛋白1和HRP标记的DNA酶1样蛋白1抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后,加入底物TMB进行显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,最终转化成黄色。颜色的深浅与样品中DNA酶1样蛋白1的浓度正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),并通过标准曲线计算样品中DNA酶1样蛋白1的浓度。

脱氧核糖核酸酶Ⅰ的特点

脱氧核糖核酸酶Ⅰ是一种核酸内切酶,最早由M.Kunitz结晶得到。它对离子的存在有明显的影响。作为一种研究材料,脱氧核糖核酸酶Ⅰ在核酸的研究中得到广泛应用。

脱氧核糖核酸酶Ⅰ是最有代表性的核酸内切酶之一。它最早由M.Kunitz从胰脏中分离出结晶,也被称为胰脱氧核糖核酸酶或DNaseⅠ,EC3.1.21.1。该酶的分子量约为3.1万,等电点为pH4.7,最适pH为7附近,需要Mg2和Mn2。它能够分解单链和双链DNA,并产生具有5′-磷酸末端的分解物。

在一般条件下,脱氧核糖核酸酶Ⅰ的分解产物含有1到8-12个寡聚核苷酸,平均大小约为四个核苷酸。它首先分解dpPupPy键,但切断方式受到二价离子的影响。由于脱氧核糖核酸酶Ⅰ容易结晶,因此在核酸的研究中得到广泛应用。同时,由于其整个结构已经明确,也成为酶化学研究的重要材料。

应用[4][5]

聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1在低剪切力诱导的动脉粥样硬化中的作用及机制研究

动脉粥样硬化(AS)是一种慢性炎症性疾病,最初发生于血流动力学紊乱的血管分叉或狭窄的部位。

局部血流变化与这种部位特异性密切相关,其中一个重要因素是剪切力(WSS)。剪切力是血液在血管中流动时对血管内膜产生的一种摩擦力。剪切力的大小与血液流速成正比,与管腔半径成反比。生理剪切力的大小介于0.5-1.2Pa,小于0.5Pa或大于1.2Pa分别称为低剪切力和高剪切力。剪切力作用于内皮细胞能引起胞内各种信号转导分子的激活,如蛋白激酶C(PKC)、丝裂原活化的蛋白激酶(MAPK)等。

此外,低剪切力能够促进促动脉硬化物质在管腔和管壁之间的转运,从而促进动脉粥样硬化的发生。聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1(PARP-1)是一种高度保守的DNA结合蛋白。作为一种核酶,PARP-1参与了DNA损伤后的修复。

一旦与损伤的DNA结合,PARP-1会被激活并催化烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)裂解为尼克酰胺和ADP核糖,从而在DNA修复、基因转录、细胞周期、细胞死亡、染色体功能和遗传稳定性中发挥重要作用。然而,过度活化的PARP-1会导致细胞内NAD+和ATP的耗竭,进而引起细胞能量危机、细胞毒性和细胞死亡。

参考文献

[1]Deficiency of Rac1 Blocks NADPH Oxidase Activation,Inhibits Endoplasmic Reticulum Stress,and Reduces Myocardial Remodeling in a Mouse Model of Type 1 Diabetes[J].Li,Jianmin,Zhu,Huaqing,Shen,E,Wan,Li,Arnold,J Malcolm O,Peng,Tianqing.Diabetes.2010(8)

[2]Modulation of myocardial metabolism:an emerging therapeutic principle[J].John D Horowitz,Yuliy Y Chirkov,Jennifer A Kennedy,Aaron L Sverdlov.Current Opinion in Cardiology.2010(4)

[3]Diabetic cardiomyopathy:mechanisms and therapeutic targets[J].Pavan K Battiprolu,Thomas G Gillette,Zhao V Wang,Sergio Lavandero,Joseph A Hill.Drug Discovery Today:Disease Mechanisms.2010(2)

[4]Regulation of the expression of inducible nitric oxide synthase[J].Andrea Pautz,Julia Art,Susanne Hahn,Sebastian Nowag,Cornelia Voss,Hartmut Kleinert.Nitric Oxide.2010(2)

[5]秦伟栋.聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1在低剪切力诱导的动脉粥样硬化中的作用及机制研究[D].山东大学,2013.

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