为什么使用瑞氏-姬姆萨复合染色法代替革兰染色法? ¹

在日常工作中，使用瑞氏-姬姆萨复合染色法代替革兰染色法具有许多优点。这种方法简便、快速，能够将革兰阴性双球菌染成深紫色，颜色鲜明，有利于观察。瑞氏染液对胞浆着色好，姬姆萨染液对胞核着色好，两者的合并使得瑞氏-姬姆萨复合染色液可以兼得两者的优点，相互补充，有利于显微镜下细胞的辨别。

与革兰染色相比，瑞氏-姬姆萨复合染色法避免了加热温度过高导致细胞破裂和细胞外错判的问题。此外，涂片过厚时易将革兰阴性染成革兰阳性，而乙醇脱色不彻底或过度会影响结果判断。特别是对于病情较长的女性阴道分泌物，由于杂菌较多，革兰染色的特异性与敏感性均较差，因此WHO不推荐用革兰染色检查女性病人。

如何应用瑞氏-姬姆萨复合染色法进行布氏杆菌检出？

使用瑞氏-姬姆萨复合染色液法可以对布氏杆菌进行染色检出。首先，取患者的血液进行布氏杆菌的分离培养。在分离培养后，使用瑞氏-姬姆萨染色法对布氏杆菌进行检出。在制作血涂片之前，需要对血涂片进行固定，以防止细胞在染色过程中脱落。具体的步骤包括：

1. 使用铅笔在血涂片上进行标记，并将血涂片平放在染色架上，可以使用蜡笔划线来防止液体外溢。
2. 待血涂片自然干燥后，滴加瑞氏-姬姆萨复合染色液(A液)数滴覆盖血片，染色1分钟。
3. 滴加稍多体积的缓冲液（B液），用吸耳球将其与染液吹匀，染色5分钟。
4. 慢慢摇动玻片，然后用细的自来水流从玻片的一侧冲去染液（不要先倒去染液再冲水），待血片自然干燥后（或用滤纸吸干），即可进行镜检。

主要参考资料

[1] 瑞氏-姬姆萨复合染色法在分泌物涂片中的应用价值

[2] CN201810051701.6一种布氏杆菌检出方法