2',7'-二氯荧光素二乙酸酯的应用及检测方法？ ¹

2',7'-二氯荧光素二乙酸酯是一种荧光探针，具有非极性特性，可迅速扩散到细胞内。细胞内的酯酶会将其水解为非荧光的二氯荧光素（DCFH），从而将探针装载到细胞内。

应用举例

CN201610307068.3报道了一种测定卷烟烟气有害成分诱导细胞氧化应激ROS的方法。卷烟烟气是一种复杂的气溶胶，含有多达8000种化学成分和1014-1016个自由基，具有氧化性。卷烟烟气中的氧化性物质会导致细胞内活性氧（ROS）增加，进而对细胞内的蛋白质、脂质和DNA等造成损伤。

该测定方法利用荧光探针2',7'-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）检测细胞氧化损伤后胞内活性氧ROS水平。具体步骤包括：1) 配置实验试剂；2) 细胞接种培养；3) DCFH-DA探针装载；4) 卷烟烟气有害成分染毒；5) ROS检测。

DCFH-DA作为一种非极性化合物，能够快速扩散到细胞内。细胞内的酯酶将其水解为非荧光的二氯荧光素（DCFH），从而将探针装载到细胞内。在存在ROS的条件下，DCFH被氧化生成荧光物质DCF，发出绿色荧光，其强度与细胞内活性氧水平成正比。

参考文献

[1] [中国发明] CN201610307068.3 卷烟烟气有害成分诱导细胞氧化应激ROS的测定方法