海马椎体神经元是海马区的主要成分,对近期记忆、情绪及内脏功能调节起着重要作用。小鼠海马神经元细胞培养是研究神经细胞生物学特性和外源干扰因素作用的有效细胞模型,在神经生物学和发育生物学体外实验研究中得到广泛应用。
传代前准备--胰蛋白酶消化--吹打分散细胞--分装稀释细胞--继续培养
1) 将培养瓶内旧的培养液弃掉,然后用D-Hanks液洗两次,确保干净。
2) 加入0.25%胰酶-EDTA消化,25cm培养瓶加入0.4ml,37度消化5min,细胞变圆,间隙增大。
3) 立即加入含10%FCS的培养液终止消化,用细胞刮刀轻刮,注意刮刀刮下细胞时对细胞的损伤较小。
4) 离心,弃上清,加入新的培养液(10%FCS),小心吹匀,分装入新的培养瓶。
1、不要轻易改变培养液,以免影响细胞的生长。
2、如果想节省消化液,可使用DPBS洗涤培养瓶,去除影响消化液作用的成分。
3、自配消化液要调整pH值,并注意保存和预热。
4、进行严格的无菌操作。
5、适度消化,注意观察细胞形态的变化,一旦出现异常,立即终止消化。
有研究探索了枸杞多糖对HT22细胞缺糖缺氧再灌注损伤的影响,结果显示枸杞多糖能够减轻细胞过氧化损伤。
此外,还有研究发现十溴联苯醚(PBDE-209)可能通过氧化应激和内质网应激诱导海马神经元细胞凋亡。
[1] 枸杞多糖对小鼠海马神经元细胞系缺糖缺氧再灌注损伤的影响
[2] 十溴联苯醚诱导小鼠海马神经元细胞氧化应激和凋亡的机制