西酞普兰草酸盐的含量测定方法及结果？ ¹

背景及概述^[1]

西酞普兰草酸盐（CIT）是一种有效的抑郁症治疗药物，具有良好的耐受性和少量的不良反应。它被广泛推荐作为长期治疗抑郁症的首选药物。CIT于1998年获得美国FDA批准上市，并于1999年在中国市场销售。CIT是一种消旋体，其中S-对映体对5-羟色胺的再摄抑制作用更强，而R-对映体的作用微弱。

仪器及试药^[1]

本实验使用美国Agilent Hypersil 1010型HPLC仪和DVD检测器。S-CIT对照品和样品由广州佐森生物科技有限公司提供。S-CIT对照品经过精制，其R型异构体含量小于4.0%，其他杂质含量小于0.5%。甲醇和乙腈为色谱纯，冰醋酸和三乙胺为分析纯，水为经蒸馏处理的去离子水。

方法与结果^[1]

1、色谱条件

使用Chirobiotic V手性柱（250mm*4.6mm，5μm），流动相为甲醇-乙酸-三乙胺（100:0.1:0.1）。检测波长为240nm，色谱柱温度为20℃，流速为1.0mL/min。S型和R型异构体之间的分离度大于1.5，R型异构体和S型异构体的保留时间分别约为14.3min和15.5min。

2、线性关系考察

精确称取S-CIT对照品，溶解并稀释制成浓度为10、25、50、100、150μg/mL的溶液。取各溶液20μL进行进样，记录各主要峰的峰面积。通过以平均峰面积（A）为纵坐标，浓度（C，μg/mL）为横坐标进行线性回归，得到回归方程为A=49224.78C-55.066（r=0.9991，n=5）。结果表明，在10~150μg/mL范围内，S-CIT的峰面积与浓度呈良好的线性关系，且S型和R型异构体的分离度大于1.5。

3、精密度试验

重复进行线性范围试验中的25、50、100μg/mL浓度的进样5次，记录各组分的峰面积，计算各组分峰面积的相对标准偏差（RSD）。结果表明，S-CIT的RSD为1.0%<2.0%。

4、回收率考察

取S-CIT储备液，分别稀释成含有25、50、100μg/mL的溶液，按照标准曲线的色谱条件进行进样，计算回收率。结果表明，S-CIT的平均回收率分别为99.32%、99.27%、99.87%，RSD在0.8%~2.6%的范围内。

5、检测限

使用含有5μg/mL S-CIT对照品的溶液进行进样，进样量为6μL，检测限为0.03μg（信噪比为10）。

6、样品测定

取约10mg的S-CIT样品，溶解并稀释制成浓度为100μg/mL的溶液。取20μL进样进行液相色谱分析，根据归一法计算样品中R型异构体和S型异构体的含量比例。结果显示，R型异构体均在5%以下，且分离度大于1.5。详细结果见表1。

参考文献

[1]杨雪梅,刘旭,严轶琛,徐江平.S-西酞普兰草酸盐含量测定[J].中国新药杂志,2004(11):1020-1021.