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如何给ELISA样本加样?

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  1.细胞上清:前处理必须是细胞离心去除,每孔直接加100μl即可。如果浓度太高需稀释时,用标准品稀释液直接稀释。

  2.脑脊液:前处理必须是细胞离心去除,每孔直接加100μl即可。如果浓度太高需稀释时,用标准品稀释液直接稀释。

  3.血清血浆:请加入50ul样本分析缓冲液后加50ul标本,如稀释量大,请将样本与样本分析缓冲液等量加入,不足部分用标准品稀释液补充至100ul。

  ① 血清标本应是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液。

  ② 血浆标本,推荐用EDTA的方法收集若待测样本不能及时检测,标本收集后请分装,冻存于-20℃,避免反复冻融。

  ③ 血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂。

  ④ 标本应清澈透明,检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除。

  ⑤ 请勿使用溶血,高血脂或污染的标本检测,否则结果将不准确。

  4.组织匀浆液的样:要制备过程中需要在缓冲液中加入蛋白酶抑制剂,防止蛋白成份被内源性蛋白酶降解,造成检测结果的值偏低。因组织匀浆液的样本蛋白种类多,含量丰富,实验参照血清血浆标本的处理方法进行,否则就会影响实验结果。

  具体是加入50 ul样本分析缓冲液后加50 ul标本,需稀释时,请将样本与样本分析缓冲液等量加入,不足部分用标准品稀释液补充至100ul。因为目标蛋白不同,可能造成降解的蛋白类型可能不一样。
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