小鼠F9细胞是来源于小鼠畸胎瘤组织上皮细胞样贴壁细胞的小鼠畸胎瘤细胞/小鼠胚胎癌细胞。该细胞在维甲酸和联丁酰环磷腺苷(cAMP)刺激下，可以分化成体壁内胚层，并合成血浆酶原活化因子、层粘连蛋白和Ⅳ型胶原质。F9细胞中含有3个拷贝β1整合素基因，并且经检测为鼠痘病毒阴性。
以下是培养小鼠F9细胞的操作步骤：
1. 取出25cm2培养瓶，用75%酒精消毒，并将封口膜拆下。将培养瓶放入37℃、5%CO2的细胞培养箱中静置6-8小时或过夜，以稳定细胞状态。
2. 小鼠F9细胞为终末分化的细胞，建议直接使用，不建议扩大培养。
3. 当细胞状态最佳时，进行以下实验：
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次。
2) 向培养瓶中加入约1mL的0.125%胰蛋白酶消化液，放入37℃温水浴中，约2-3分钟。倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，吸弃消化液，并加入完全培养液终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按适当的比例（如1:2或1:3）进行传代接种，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃、5%CO2的细胞培养箱中培养。
4) 待细胞完全贴壁后，进行培养观察，并每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
通过荧光定量PCR、蛋白免疫印迹、细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡等实验，研究了SATB1的表达量对小鼠F9细胞增殖、周期和凋亡的影响。
研究结果显示：
1. 实时荧光定量PCR检测结果表明，小鼠F9细胞中SATB1表达丰富。在不同浓度（0mmol/L、1.5mmol/L、2mmol/L、2.5mmol/L）的尼克酰胺处理下，通过荧光定量PCR和蛋白免疫印迹检测，发现处理后的小鼠F9细胞中SATB1的表达量明显下调，且随着尼克酰胺浓度的增加，SATB1的表达量逐渐降低。此外，将处理48小时后的细胞换成不含尼克酰胺的培养液培养36小时后，SATB1的表达出现明显回升，说明尼克酰胺可以下调SATB1的表达。
2. 利用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡，发现使用不同浓度的尼克酰胺处理后，大部分细胞被阻碍在G1期，细胞凋亡率随尼克酰胺浓度的增加而明显升高。通过CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况，发现在36小时和48小时时，尼克酰胺处理组的细胞增殖明显受到抑制，尼克酰胺能够抑制小鼠F9细胞的增殖并诱导凋亡。
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