冠状动脉平滑肌细胞的特点及其应用研究？ ¹

冠状动脉平滑肌细胞是人体正常心脏组织中的一种细胞类型，其免疫荧光染色结果显示阳性表达平滑肌肌动蛋白（α-SMA）。

冠状动脉是心脏血液供应的重要动脉，起源于主动脉根部并分为左右两支，分布于心脏表面。冠状动脉疾病的发生和发展与血管平滑肌细胞的表型转变为具有增殖能力的表型密切相关。最近的研究表明，平滑肌细胞能够表达钙离子通道、ICAM-1和VCAM-1。其中，ICAM-1和VCAM-1的表达可能导致血管壁炎症反应，并进一步引发血管疾病。因此，对冠状动脉血管平滑肌细胞的体外培养和研究可以用于发现和确定新的冠状血管疾病的靶向治疗方法。

平滑肌纤维呈长梭形，没有横纹。平滑肌受到自主神经支配，属于非随意肌肉。该肌肉收缩缓慢而持久。细胞核呈长椭圆形或杆状，位于细胞中央，收缩时核可以扭曲成螺旋形，核两端的肌浆较为丰富。平滑肌纤维的大小不一，一般长度为200μm，直径为8μm；小血管壁的平滑肌纤维长度可短至20μm，而妊娠子宫的平滑肌纤维长度可长达500μm。平滑肌主要分布于血管、气管、胃、肠等器官的壁内。平滑肌纤维可以单独存在，但大部分以束状或层状分布。

冠状动脉平滑肌细胞功能受Neuregulin-1影响的研究

本研究旨在检测Neuregulin-1因子处理对冠状动脉平滑肌细胞增殖、迁移、存活和蛋白表达的影响。

方法：选取第3-6次传代的人冠脉平滑肌细胞（HCASMC），当细胞在培养瓶底铺满约90%或形成融合的单层后，加入Neuregulin-1（NRG-1）进行实验。根据不同浓度的NRG-1处理正常或缺血缺氧培养条件下的HCASMC进行实验分组。

利用MTT法检测不同浓度的NRG-1对HCASMC增殖的影响，利用Transwell孔板法检测不同浓度的NRG-1对HCASMC迁移的影响；利用Hoechst 33342核染色法检测NRG-1对HCASMC凋亡率的影响；利用Western blot检测在正常培养条件下NRG、ErbB2/3/4、磷酸化ErbB2受体、磷酸化ErbB3受体、磷酸化ErbB4受体以及在缺血缺氧条件下促血管生成因子-1（Ang-1）、促血管生成因子-2（Ang-2）和血管内皮生成因子（VEGF）在HCASMC中的表达水平。

结果：1、HCASMC的生长特点：培养的HCASMC呈贴壁细胞，形态呈纤维状的长梭形、杆状或蚯蚓状；在缺血缺氧条件下，HCASMC的形态较为瘦长，数量减少，生长缓慢，易于形成团块，细胞碎片较多。

2、在正常培养条件下，HCASMC表达ErbB2/3/4，不表达NRG；加入NRG-1处理后，HCASMC的磷酸化ErbB2/3/4表达增加（P<0.05）；加入抑制剂后，磷酸化ErbB2/3/4的表达减少（P<0.05）。

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