NF-κB以前涉及过一点，做的不深，只是做经典的NF-κB信号通路，我的个人经验和体会是：1. 电泳时间从积层胶到分离胶到转膜，大概要2个小时左右，我做的是积层胶90V，分离胶120V，转膜12V干转，2个小时就行了。我也是试过28V湿转的，大概要8小时左右，效果都可以；2.额外的问一下，不知道你用的多少的细胞核蛋白，我个人体会是要收集多点细胞核，比如说2-3个dish的收集，这样有时候会有好的结果；3. 有条件可以辅助免疫荧光技术观察NF-κB的核转位；
4. EMSA、荧光素酶报告基因或者CHIP来看NF-κB的转录活性也可以是很好的佐证，和支持材料，或者是下游的分子。个人体会，大家共同讨论。
