转基因元件7S 3‘终止子染料法qPCR试剂盒 操作方法： 1 确定PCR反应液或其他酶促反应液的体积。将PCR反应液或其他酶促反应液转移至一个新的1.5 ml离心管中，向其中加入等体积溶液BD。混合均匀。 2 将步骤1所获溶液置于DNA纯化柱中，静置2min。 3 12,000 rpm离心1min，弃滤液。 注：此时DNA片段被吸附于DNA纯化柱中的硅胶膜上。 若溶液体积大于纯化柱容积（800 μl），可分两次离心。 4 加入500 μl溶液PE。12,000 rpm离心1min，弃滤液。 注：溶液PE初次使用前用无水乙醇按1: 4稀释，即含80%乙醇。 此步骤的作用是去除硅胶膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他杂质，以获得高质量DNA片段。 5 加入500 μl溶液PE。12,000 rpm离心1min，弃滤液。 6 12,000 rpm 离心 3min，以彻底去除纯化柱中的液体。 注：此步骤的作用是去除残留乙醇，避免残留乙醇影响后续酶促反应。同时也利于DNA片段的充分溶解。 7 将离心柱置于新的1.5 ml离心管中。向纯化柱的中央处，悬空滴加30-100 μl溶液Eluent（60℃预热），静置2min。12,000 rpm 离心1min，管底即为目的DNA片段。贮存于-20℃。 注：溶液Eluent可用无菌双蒸水代替，但其pH需为8.0-8.5，加入体积视DNA目的片段、用户对目的片段浓度要求而定。 ...

H辅酶ⅠNAD测试剂盒微量法 操作步骤 : 实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。 7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。 选择抗凝的注意点： ①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致; ②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固; ③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）; ④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。 ...