四硫磺酸盐煌绿增菌液基础(TTB)是一种用于沙门氏菌选择性增菌培养的培养基。它需要添加煌绿和碘液。
这种培养基的原理是:蛋白胨和牛肉膏粉提供碳源、氮源和维生素,满足细菌生长的需求;氯化钠可以维持均衡的渗透压;碳酸钙可以中和细菌产生的酸和吸收有毒的代谢产物;硫代硫酸钠和四硫磺酸钠结合可以抑制肠道共生菌,而具有四硫磺酸钠还原酶的细菌可以在这种培养基中繁殖;胆盐和煌绿可以抑制大肠杆菌和其他革兰氏阳性细菌。
牦牛是青藏高原特有的物种,对当地牧民来说具有重要的生产和生活价值。牦牛沙门氏菌病在牧区长期流行,导致牦牛严重的下痢和死亡。目前,国内外对其他动物源的沙门氏菌进行了较多的研究,但对牦牛沙门氏菌的研究报道较少。由于粪便是沙门氏菌的主要来源,为了从源头控制沙门氏菌的传播,对体表健康牦牛粪便中的沙门氏菌进行监测具有重要的公共卫生学意义。
本研究对体表健康牦牛粪便中的沙门氏菌进行了分离鉴定方法及流行病学研究。
实验结果表明,在2010年采集的26份牦牛粪便中,使用三种选择性增菌液TTB、SC、MSRV和三种选择性培养基XLD、SS、CAS,比较了9种分离方法对牦牛粪便中沙门氏菌分离的影响。结果发现,使用TTB增菌液和SS培养基的组合可以获得最高的分离率,为8/26。总共检测到13头牦牛携带沙门氏菌,通过比较发现,使用TTB增菌液和MSRV增菌液的组合以及CAS培养基和SS培养基可以获得最高的分离率,为12/26。
此外,根据国内外文献报道,比较了以invA、invE、stn、16S、bidui基因为检测靶点的5种PCR方法。对48株牦牛沙门氏菌进行了鉴定,结果显示这5种PCR方法的检出率均为100%,因此这5种方法可以用于牦牛源沙门氏菌的快速检测。参照Liu B等人建立的沙门氏菌血清群PCR快速检测方法,对48株牦牛沙门氏菌进行了检测,共鉴定出9株血清B群、1株C1群和37株D群,证明该方法适用于牦牛沙门氏菌血清群的PCR快速检测。
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