本文介绍了如何使用4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐来合成胡椒酸分子探针，旨在为相关研究人员提供参考依据。
简述：4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐，英文名称：4-(2-aminoethyl)benzenesulfonyl fluoride,hydrochloride，CAS：30827-99-7，分子式：C8H11ClFNO2S，外观与性状：白色粉末。4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐是一种不可逆的丝氨酸蛋白酶抑制剂。
应用：合成胡椒酸分子探针
天然产物荜茇中提取得到的荜茇宁具有显著的降血脂作用且毒性远低于他汀类药物，刘永红等人以丁二酸酐、炔丙胺盐酸盐， 4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐为原料，经过一系列的生物有机化学合成的方法合成了具有光反应活性的小分子探针。全面认识荜茇宁的降血脂作用机理的关键是分析和确定它的靶蛋白，为高效安全的降血脂药物研发提供理论基础。其中GBH-AEBSF探针的合成步骤如下：
（1）化合物(Ⅰ)的合成：
（2）化合物（Ⅱ）的合成：
（3）化合物（Ⅲ）的合成：
（4）化合物(Ⅳ)的合成：
（5）化合物(Ⅴ)的合成：
称取第四步得到的产物（Ⅳ）40 mg溶解于6.6 mL甲醇中，在冰浴体系环 境下，将1 M NaOH溶液6.6 mL于恒压滴液漏斗中缓慢滴加于上述甲醇溶液中，滴加完后，冰浴30 min，在室温下，快速搅拌反应4 h。
选用DCM：Me OH=8:1（体积比）的展开剂进行薄层色谱分析，产物（Ⅴ） 在薄层色谱板的最下端，在冰浴体系下，用1 M的HCl中和调PH为2~3， 用无油隔膜真空泵在水浴温度为45℃下，接冷阱，蒸出甲醇和水，粗产物用乙酸乙酯萃取，0.1 M HCl洗2次，饱和食盐水洗1次，（注意：由于乙酸乙酯的密度小于水的密度，所以目标产物应该在分液漏斗的上层），其次，对粗产物的溶液用无水Na2SO4干燥2h，然后，用砂芯漏斗抽滤，用循环水式多用真空泵在40℃下蒸出乙酸乙酯。
选用DCM：Me OH=8：1（体积比）的展开剂进行柱层析分离纯化此粗产物，对得到的产物进行抽真空干燥，得到产物为黄色的粉末，产物质量为29 mg， 产率为87%。
（6）化合物（Ⅵ）的合成：
称取化合物（Ⅴ）（50 mg，0.10 mmol，1.2 eq）于50 mL茄形瓶中，放入 磁子，依次加入EDC（24 mg，0.13 mmol，1.5 eq），DMAP（15 mg，0.12 mmol， 1.5 eq），用5 mL移液管取2mL DMF加入使之溶解，在冰浴体系下搅拌2 h活化化合物（Ⅴ）的羧基。
称取4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐（AEBSF）（20 mg，0.08 mmol，1.0 eq） 于50 mL茄形瓶中，依次加入1 mL溶剂DMF，50μL TEA（3.0 eq），然后把活化的化合物（Ⅴ）置于恒压滴液漏斗中缓慢滴加于此AEBSF的溶液中，冰浴 30 min后，在室温下反应12 h。
用旋片式高真空泵，连接冷阱，在水浴温度为50℃的环境下蒸出DMF，用DCM：MeOH=8：1（体积比）的混合溶液做展开剂对此粗产物进行柱层析分离纯化。对分离出的目标产物用真空干燥箱40℃抽真空干燥过夜，得到淡黄色粉末，产物的质量为44 mg，产率为79%。
将此产物（Ⅵ）命名为GBH-AEBSF探针。
参考文献：
[1]刘永红.胡椒酸分子探针的合成及特异性靶标确定的研究[D].内蒙古大学,2018.
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