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嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)ELISA KIT的工作原理是什么? 1

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嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)ELISA KIT是一种用于检测小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)的试剂盒。该试剂盒使用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体。在检测过程中,将标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素依次加入包被抗体的微孔中。经过彻底洗涤后,使用底物TMB进行显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中的该指标呈正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),可以计算样品的浓度。

人体中正常成熟的白细胞可以分为五类:中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞。嗜酸性粒细胞是白细胞的组成部分,与其他粒细胞一样来源于骨髓的造血干细胞。嗜酸性粒细胞具有杀伤细菌、寄生虫的功能,也是免疫反应和过敏反应过程中极为重要的细胞。嗜酸性粒细胞可以释放颗粒中的内容物,引起组织损伤,促进炎症进展。血液中嗜酸性粒细胞的数量表现为昼夜周期性波动。清晨细胞数减少,午夜时细胞数增多。这种细胞数的周期性变化是与肾上腺皮质释放糖皮质激素量的昼夜波动有关的。当血液中皮质激素浓度增高时,嗜酸性粒细胞数减少;而当皮质激素浓度降低时,嗜酸性粒细胞数增加。

嗜酸性粒细胞在贲门失弛缓症发病机制中的作用是什么?

通过分析嗜酸性粒细胞在贲门失弛缓症患者食管肌层的分布以及与食管壁内神经元表达的相关性,可以研究嗜酸性粒细胞在动物实验及体外实验中对食管壁内神经元的损伤作用及机制。

研究方法包括纳入贲门失弛缓症患者和对照组的标本,分别活检食管肌层的不同部位,并进行嗜酸性粒细胞计数及分布的观察。同时,使用免疫组化和ELISA技术观察嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)、嗜酸性粒细胞来源神经毒素(EDN)、嗜酸性粒细胞趋化因子以及食管壁内神经元的分布。最后,分析贲门失弛缓症患者食管肌层嗜酸性粒细胞计数与临床数据的关系。

参考文献

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[2] The Chicago Classification of esophageal motility disorders, v3.0[J]. P.J. Kahrilas, A.J. Bredenoord, M. Fox, C.P. Gyawali, S. Roman, A.J.P.M. Smout, J.E. Pandolfino. Neurogastroenterol. Motil. 2015(2)

[3] Associations among gut permeability, inflammatory markers, and symptoms in patients with irritable bowel syndrome[J]. Robert J. Shulman, Monica E. Jarrett, Kevin C. Cain, Elizabeth K. Broussard, Margaret M. Heitkemper. Journal of Gastroenterology. 2014(11)

[4] 晋弘. 嗜酸性粒细胞诱导食管壁内神经元损伤在贲门失弛缓症发病机制中的探讨[D]. 天津医科大学, 2018.

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