多克隆抗体制备的步骤是什么? ¹

多克隆抗体制备是一种通过刺激机体产生免疫反应来制备免疫球蛋白的过程。多克隆抗体具有识别多个抗原表位、引起沉淀反应的特点，因此在研究和诊断方面得到广泛应用。

制备多克隆抗体的步骤包括：

1、制备抗原。

2、选择实验动物。

3、对实验动物进行免疫。

4、测试免疫效果。

5、采集全部血清。

6、纯化抗体。

7、鉴定抗体的纯度和特异性。

多克隆抗体的应用

用于猪ISG43和ISG60蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

研究人员克隆了ISG60和ISG43基因，并将其连接到pMD18-T载体，然后插入PET-32a（+）克隆位点。经过诱导表达和纯化后，获得了对ISG43和ISG60蛋白具有高反应性和特异性的多克隆抗体。

通过Western Blot检测，这些抗体能与原核表达蛋白和经PolyI:C诱导产生的相应蛋白发生特异性反应。

参考文献

[1]Screening of cellular proteins that interact with the classical swine fever virus non-structural protein 5A by yeast two-hybrid analysis[J].Chengcheng Zhang,Lei He,Kai Kang,Heng Chen,Lei Xu,Yanming Zhang.Journal of Biosciences.2014(1)

[2]Usp18 Driven Enforced Viral Replication in Dendritic Cells Contributes to Break of Immunological Tolerance in Autoimmune Diabetes[J].Nadine Honke,Namir Shaabani,Dong-Er Zhang,George Iliakis,Haifeng C.Xu,Dieter H?ussinger,Mike Recher,Max L?hning,Philipp A.Lang,Karl S.Lang.PLOS Pathogens.2013(10)

[3]Usp18 deficient mammary epithelial cells create an antitumour environment driven by hypersensitivity to IFN‐λand elevated secretion of Cxcl10[J].Christoph Burkart,Kei‐ichiro Arimoto,Tingdong Tang,Xiuli Cong,Nengming Xiao,Yun‐Cai Liu,Sergei V.Kotenko,Lesley G.Ellies,Dong‐Er Zhang.EMBO Mol Med.2013(7)

[4]Ubiquitin specific protease 18（Usp18）is a WT1 transcriptional target[J].Mohammad Shahidul Makki,E.Cristy Ruteshouser,Vicki Huff.Experimental Cell Research.2013(5)

[5]姜炳星.猪ISG43和ISG60蛋白的原核表达及多克隆抗体制备[D].广西大学,2017.