各位老师同学,真心请教一下——我的实验想观察缺血再灌注后NF-kB p65的活化。做了免疫组化和western blot。结果发现western blot可以看到胞浆和胞核蛋白均明显增加,这说明总的NF-kB p65增加了吗?我看丁香园中有的前辈说总蛋白是不变的。请问为什么western的结果是这样?还有缺血再灌注损伤后免疫组化结果是胞浆中的NF-kB明显增加但看不到NF-kB入核,不知道为什么看不到明显的入核改变。是取材时间的问题吗?多谢各位前辈多多指教!