大分子蛋白总是不出条带，怎么办?

从几个方面查找原因吧：1.转膜条件是否合适，150KD大小的蛋白的转膜条件应该有很多人摸索过得，先需要确定蛋白成功转至膜上2.一抗和二抗的比例，是经过尝试的么，有没有提前在ELISA上验证反应性。3.曝光显色试剂是否失效，尽量使用新鲜有效的。