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硅胶柱层析分离未知氯仿萃取物流动相的确立?

我使用硅胶柱分离氯仿萃取部分,目前知道氯仿层有活性物质,但不知道具体是什么,想多分离出来几种物质进行下活性研究。现有以下几个问题不明白,希望大家赐教。

1.流动相应该使用什么合理啊?我看有前面资料说用石油醚:乙酸乙酯或石油醚:丙酮,我想知道哪个好一些啊

2.假设用石油醚:乙酸乙酯做流动相 梯度洗脱 都应该设置什么比例啊 ,每个组分的比例 又应该冲多少柱体积啊

3.薄层板追踪的话,薄层的展开剂应该使用什么啊,因为是未知化合物,薄层的显色剂又应该选择什么啊

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共1个回答
其实很简单,第一次你就用石油醚-乙酸乙酯,上硅胶柱,按梯度洗脱,最后甲醇压柱。 然后每段点板合并。接下来,根据你点板的情况,对你要进一步分离的段,用等度或者梯度进一步分离纯化,直到最后分离到纯化合物。 TLC检测,用石油醚-乙酸乙酯或者石油醚-丙酮或者二氯甲烷-甲醇,分别比较下,哪个效果好就用哪个。显色剂用10%硫酸,如果你知道是什么类型成分就用专属性显色剂。
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