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液相用磷酸二氢钾和水70:30测甲酸后,流动相基线波动巨大。。。。求指导?

1、仪器品牌:岛津2、色谱柱参数如下? ?? ?Agilent TC-18? ?? ? 5um? ?? ? 4.6*250mm? ?? ? 带保护柱的今天一个新手在我监看下做液相,操作没什么问题。。。但是这个流动相我不知道是不是能用。。。3、目标物质甲酸,流动相:磷酸二氢钾:水=70:304、现在问题:a、基线难平稳。用上述流动相之前我们一般用甲醇:水=70:25、75:25测其他物质,这是第一次有人用这样的流动相,跑基线时候,两个小时后才稍微显得平稳,但相比我们平时而言还是很不平稳(平时我们把纵坐标放大到显示1或者2.5的样子都能平稳。。。)b、测完后按往常用甲醇冲洗,冲了3小时(0.8ml/min)无法达到基线问题,基本上是总会往上漂或者往下掉。c、开始搜素网上,有人说是流通池污染了,但我又不敢拆下来,就换了别人的色谱柱和保护柱子后基线基本能达到平时的要求。。。整个过程中,压力都很稳定,流动相也都过滤超声好了。请问各位专家这是不是意味这我的柱子彻底坏了啊?这是因为什么啊?求慷慨指教。。。请问您我应该如何解决这个问题啊,用分析纯异丙醇冲洗有用吗(一定要用色谱纯的吗)?会损坏柱子吗?欢迎大家交流回帖~一定慷慨给金币!!
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共7个回答
1、我用甲醇冲了很久,如前面所说,3h还不能平稳,是还要更久吗?还是换异丙醇试一下啊?2、氘灯在之前用磷酸二氢钾:水=70:30测甲酸后,换了流动相到纯甲醇冲柱子出现了一次检测器自检不通过,然后我重启检测 ... 这个现象一个可能是氘灯寿命到了,或者是检测池有污染
自己先顶一个,别沉下去了。。。还有我用的是:等度洗脱
尽量不要用纯水相,会损坏柱子,而且重复性也不好至少保留5%的有机相,出峰过早可以降低流速
普通的c18在纯水中,碳链是无法展开的各个品牌柱子,都有可以耐纯水相的c18,一般是极性基团修饰后的c18,可以试试基线不平可能跟色谱柱污染有关,多冲一下用甲醇,而且短波长都氘灯能量要求也高,是否是氘 ... 1、我用甲醇冲了很久,如前面所说,3h还不能平稳,是还要更久吗?还是换异丙醇试一下啊?2、氘灯在之前用磷酸二氢钾:水=70:30测甲酸后,换了流动相到纯甲醇冲柱子出现了一次检测器自检不通过,然后我重启检测器和泵,自检通过了,但用时比平时长了好几分钟了3、之后我换了他人的柱子,第一次检测器自检也没有通过,但后来重启2次才通过,之后用纯甲醇冲他的柱子,可以基本达到我平时的平稳程度。
尽量不要用纯水相,会损坏柱子,而且重复性也不好至少保留5%的有机相,出峰过早可以降低流速 多谢专家交流,那还请问1、您的意思是之前流动相差了有机相所以不平?那为什么之后换纯甲醇冲也一直不平呢?2、主要是现在我的柱子这个情况怎么才能恢复呢?平时都用的甲醇:水=70:30或70:25的测酚类的,用异丙醇冲有用吗?分析纯的可以用吗?
普通的c18在纯水中,碳链是无法展开的各个品牌柱子,都有可以耐纯水相的c18,一般是极性基团修饰后的c18,可以试试基线不平可能跟色谱柱污染有关,多冲一下用甲醇,而且短波长都氘灯能量要求也高,是否是氘灯老化造成分析纯的也可以用,但是最好选好一点的厂家的。
尽量不要用纯水相,会损坏柱子,而且重复性也不好至少保留5%的有机相,出峰过早可以降低流速 1、她参考的是这个文章的做法:HPLC测定塞克硝唑中甲酸的含量HPLC Determination Of Formic Acid In Secnidazole2、可能他用的磷酸二氢钾是分析纯而非色谱纯,请问影响大吗?QQ截图20130427142601.jpg,
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