网状纤维是一种由网状细胞产生的纤维,直径通常在0.2~1.0μm之间,具有韧性而缺乏弹性。网状纤维染色是一种常用的染色方法,通过氨银浸法进行。改良Gomori网状纤维染色方法通过甲醛还原成金属银,使网状纤维更加清晰可见。
网状纤维染色液(改良Gomori银氨法)的步骤包括氧化、漂白、媒染、浸银、还原等。与其他方法不同的是,该方法不需要使用硫代硫酸钠溶液洗去未还原的银盐。
网状纤维染色液(改良Gomori银氨法)常用于鉴别肿瘤的性质和来源,如癌与肉瘤、淋巴肉瘤与网状细胞肉瘤等。此外,该方法还可用于骨尤文瘤与骨网状细胞肉瘤、脑膜瘤与星形细胞瘤、恶性神经鞘瘤及早期浸润癌等的鉴定。
1、将组织固定于10%福尔马林固定液,并进行常规脱水包埋。
2、切片厚度为4μm,进行常规脱蜡至水。
3、将切片放置在染色架上,滴加Gomori氧化剂,进行氧化5分钟。
4、稍作水洗。
5、将切片放入草酸溶液中漂白1~2分钟。
6、用流水冲洗2分钟,然后用蒸馏水稍作洗涤。
7、滴加硫酸铁铵溶液进行媒染5分钟。
8、稍作水洗,然后用蒸馏水稍作洗涤。
9、滴加网状纤维染色液(改良Gomori银氨法)进行染色3分钟。
10、用蒸馏水稍作洗涤。
11、使用Gomori还原剂进行还原1分钟。
12、用流水冲洗10分钟。
13、进行常规脱水透明处理,然后使用中性树胶封固。
1、玻璃器皿必须用洗涤液浸泡1天,然后用自来水冲洗干净,最后用蒸馏水冲洗2次。
2、10%福尔马林固定液是较为适合的固定液,不宜使用含汞的固定剂如Zenker液,否则可能导致切片出现非特异性沉淀。
3、网状纤维染色液(改良Gomori银氨法)对光线敏感,不太稳定,应在4℃下保存,并在恢复至室温后使用。
[1] 网状纤维染色液(改良Gomori银氨法)操作说明