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RAP试剂盒的应用领域是什么? 1

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RAP试剂盒是一种用于研究RNA与DNA、RNA及蛋白质之间相互作用的实验工具。它结合了高通量测序(RAP-Seq)和质谱技术(RAP-MS),可以分别研究与目标RNA互作的基因和蛋白质。通过设计生物素或链霉亲和素探针组,RAP技术可以将目标RNA与其共同作用的DNA、RNA或蛋白质附着在磁珠上,然后进行进一步的分离和分析。该技术可以用于研究基因表达调控相关蛋白的结构和功能。

RAP试剂盒的组成和试剂配制

RAP试剂盒包括以下组分:

  1. 酶联板(Assay plate)
  2. 标准品(Standard)
  3. 样品稀释液(Sample Diluent)
  4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent)
  5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRP-avidin Diluent)
  6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody)
  7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin)
  8. 底物溶液(TMB Substrate)
  9. 浓洗涤液(Wash Buffer)
  10. 终止液(Stop Solution)

RAP试剂盒的应用

RAP试剂盒可用于研究基因表达调控相关蛋白的结构和功能。例如,通过RAP试剂盒的Western blot分析,可以证明当结合DNA的氨基酸残基突变后,酵母细胞内的H4K20me2/3的甲基化水平发生改变。此外,RAP试剂盒还可以用于研究其他基因调控蛋白的功能和相互作用。

参考文献

  1. Reading chromatin[J].Julia M.Schulze,Alice Y.Wang,Michael S.Kobor.Epigenetics.2010(7)
  2. Degrees make all the difference:The multifunctionality of histone H4 lysine 20 methylation[J].Yu Wang,Songtao Jia.Epigenetics.2009(5)
  3. Regulation of Set9-Mediated H4K20 Methylation by a PWWP Domain Protein[J].Yu Wang,Bharat Reddy,James Thompson,Hengbin Wang,Ken-ichi Noma,John R.Yates,Songtao Jia.Molecular Cell.2009(4)
  4. Structural and Functional Studies of the Rap1 C-Terminus Reveal Novel Separation-of-Function Mutants[J].Elizabeth A.Feeser,Cynthia Wolberger.Journal of Molecular Biology.2008(3)
  5. Chromatin Modifications and Their Function[J].Tony Kouzarides.Cell.2007(4)
  6. Structural Basis for the Methylation State-Specific Recognition of Histone H4-K20 by 53BP1 and Crb2 in DNA Repair[J].Maria Victoria Botuyan,Joseph Lee,Irene M.Ward,Ja-Eun Kim,James R.Thompson,Junjie Chen,Georges Mer.Cell.2006(7)
  7. Anc1 interacts with the catalytic subunits of the general transcription factors TFIID and TFIIF,the chromatin remodeling complexes RSC and INO80,and the histone acetyltransferase complex NuA3[J].Mehdi Kabani,Katia Michot,Claire Boschiero,Michel Werner.Biochemical and Biophysical Research Communications.2005(2)
  8. 张稳.基因表达调控相关蛋白的结构和功能的研究[D].中国科学技术大学,2011.
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