人神经小胶质细胞是中枢神经系统中的一种免疫防线,起源和功能备受关注。大脑皮质覆盖着每个大脑半球的大部分,其中集中了神经元胞体。小胶质细胞是一种类似于巨噬细胞的神经胶质细胞,广泛分布在中枢神经系统中。关于小胶质细胞的起源,目前仍存在争议,有人认为它们起源于外胚层,也有人认为它们来源于骨髓造血干细胞。小胶质细胞是CNS固有的免疫成分细胞,具有吞饮功能和一定的迁移能力。在许多病理条件下,小胶质细胞会被活化,表现为增生、聚集以及形态、免疫表型和功能等方面的变化。
小胶质细胞在大脑发育的过程中起到重要作用。它们可以作为大脑的巨噬细胞,在细胞死亡、中枢神经系统受损或病理损伤时发挥作用。此外,小胶质细胞还能表达抗原,进行巨噬作用,并与造血细胞和巨噬细胞组织共享抗原。
为了分离纯化人神经小胶质细胞,可以从人工药物引产的胎儿脑组织中获取混合胶质细胞悬液,然后通过培养和纯化步骤得到高纯度的小胶质细胞。具体的方法包括细胞密度调整、摇动法分离贴壁不牢的细胞、胰酶-EDTA消化法结合差速贴壁法进行纯化等。分离得到的小胶质细胞可以通过激光共聚焦显微镜技术和流式细胞术等方法进行鉴定和评价。
人神经小胶质细胞可以通过酶消化法结合差速贴壁法进行培养。在培养基营养缺失数天后,可以通过摇床震荡收集脱落细胞制备细胞悬液。经过免疫荧光鉴定,可以得到纯度达90%以上的小胶质细胞。同时,这些细胞不含有一些病原体,如HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
[1]小胶质细胞的发育和功能
[2]人小胶质细胞的分离、纯化、特异分子表达与吞噬功能研究