草甘膦是一种无色晶体状物质，可以以粉末或颗粒形式与空气混合，但可能会引发粉尘爆炸。在干燥状态下，由于搅拌、空气输送和注入等操作会产生静电。加热时，草甘膦会分解并产生含有氮氧化物和磷氧化物的有毒烟雾。
草甘膦是一种具有两性离子结构的甘氨酸衍生物。其离子状态取决于水溶液的pH值，当pKs＜2时，胺基团会质子化；当pKs=10.6时，羧基和两个羟基的氢会解离。草甘膦是白色无味的晶体，熔点为189.5℃，并伴随着分解。其蒸气压为1.31×10-2 mPa (25℃)，亨利常数＜2.7×10-7 Pa · m3 /mol (约20℃)，辛醇/水分配系数Kow logP ＜-3.2（pH 2~5，20℃），相对密度为1.704 (20℃)，pKa为5.73。草甘膦在不同溶液中的溶解度为：水10.5g/L (pH 1.9)、丙酮0.078g/L、二氯甲烷0.232g/L、乙酸乙酯0.012g/L、甲醇0.231g/L、2-丙醇0.02g/L、甲苯0.036g/L。在pH 5、6、9（5~35℃）时不发生水解。草甘膦不易燃，不会爆炸，在常温下可以稳定储存。但它对中碳钢和镀锌铁皮具有腐蚀作用。
草甘膦可以用于防除防火隔离带的杂草和杂灌，使用药量为1950~2437.5 g/hm2；也可以用于非耕地和杂草的茎叶喷雾，使用药量为1170~1462.5 g/hm2。此外，草甘膦还可以用于防除夏玉米田、春玉米田、冬油菜田（免耕）、棉花田等一年生杂草，使用药量为750~1650 g/hm2的行间定向茎叶喷雾。对于柑橘园、剑麻园、梨园、苹果园、桑园、香蕉园、橡胶园、茶园等一年生及部分多年生杂草，草甘膦的使用药量为1125~2250 g/hm2的定向茎叶喷雾。此外，草甘膦还可以用于防除免耕春油菜田、免耕抛秧晚稻田等一年生杂草，使用药量为1500~2550 g/hm2的茎叶喷雾。
根据中国农药毒性分级，草甘膦属于微毒物质。这是因为在高等动物体内没有莽草酸代谢途径。根据世界卫生组织对农药危害性的分类，草甘膦属于Ⅲ类（轻度危害）。
研究人员发现，中美洲肾病（Mesoamerican Nephropathy，简称MeN）在尼加拉瓜和萨尔瓦多的年轻男性甘蔗工人中流行率异常高。这种肾病与甘蔗种植中常用的除草剂草甘膦有关，草甘膦可能破坏与肾功能有关的多种蛋白质的合成，从而引发该肾病。
通过基因改造，作物可以被赋予耐草甘膦的特性，从而大幅提高使用草甘膦除草的效率。然而，草甘膦对大鼠体细胞具有毒性，因此欧盟对食水中的残留草甘膦含量有严格的规定。根据德国莱比锡大学于2011年12月进行的一项研究，柏林市区居民的尿液样本中发现的草甘膦残留含量比欧盟食水中的残留标准高出5到20倍。这表明草甘膦在人类的食物链中不断残留积累。因此，目前有建议完全禁用草甘膦。
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