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毕赤酵母GS115表达?

各位朋友们好,我是做毕赤酵母转化的,载体为pPICZαA,现在遇到了表达的抗菌肽无活性的问题。操作:
挑多个单菌落于25mlBMGY(250ml锥形瓶)培养基中,养一天半左右,换成200ml的BMMY培养基(500ml锥形瓶),每天加甲醇诱导,但是没有活性(上半年养的最后一批上清也没有抑菌圈,但是过了一个寒假,放在四度里,又有活性了)
此外,在BMGY培养基里养的时候,浓度也上不去,到达不了文献里说的那么高(要求OD600达到8.0)

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BMGY时间再长点?我们BMGY摇过三天

而且建议等体积更换,即多少BMGY就换到多少BMMY中,不要做稀释,同时培养基体积不应该超过瓶体积的1/3。

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