发酵培养链霉菌的问题？
请问一下，我之前是用50%甘油管保存的ISP2种子液,放在-20冰箱里。这次想大规模发酵,-20拿出来-4梯度复苏之后涂在产孢固体培养基上。培养了5天产的孢子相当少，用无菌水刮下来之后放进种子液发酵两天发现结球而且很稀（摇床放了玻璃珠。加到了10L培养基里,和以前相比稀了很多一直结球镜检是没有染菌的。培养了4天活性检测没有活性。请问一下大佬们哪个步骤出问题了或者我下次发酵应该优化哪里呢？（我后来用保的菌重新涂平板/划线 基本不长孢子了 是因为保的菌失活了吗）
谢谢大佬们了！
