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有关HEPG2 转染...
生物医学工程
有关HEPG2 转染问题请教?
最近本人在做HepG2细胞的转染,转染的是GFP质粒,按照LIPO2000的说明书使用后,发现细胞的死亡很严重,24h时差不多死了一半。所以在此请教各位高手对于HepG2的转染有比较好的条件的。
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共2个回答
橘子是只喵~,~
2022-02-12回答
可能有多种原因:
目标蛋白对细胞有毒性,导致细胞死亡;
转染试剂以及DNA用量信息需要优化,否则对细胞具有伤害;
细胞贴壁转染之后没有正常换液。
建议:
考虑对目标蛋白进行截短构建、尝试其他细胞系统;
摸索转染试剂以及DNA用量信息,如果转染试剂毒性太大,可以考虑尝试Entranster转染试剂。
对转染后的细胞进行换液处理,如果细胞状态感觉不够理想,可以考虑添加一些血清来帮助细胞恢复健康。
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方欧尼.,工艺专业主任
2019-04-16回答
提质粒用去内毒素的试剂,转染6h后换液
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