参考USP34-NF检测某物质含量:用4.6mmX150mm,5um氨基柱,流速1.5ml/min,(20mM
磷酸氢二钾+0.25%氨水+
磷酸调节PH=7.5)-乙腈=30-70,进样量20uL,柱温40℃,检测波长195nm;样品浓度1mg/ml(用50%乙腈溶解)。买了菲罗门短柱一根,用了7天,主峰峰宽由0.15变为0.5,理论塔板数由3000下降为600.
每次用之前90%水-乙腈冲洗40min,换90%乙腈-水冲30min,换30%水-乙腈冲30min,再上
流动相冲50min,开始进样品。用完以后90%水-乙腈冲洗1h,再90%乙腈-水冲洗40min,保存。
后来试过热电的250mm 氨基柱;用了大概一个月也出现了类似的问题,柱效下降,基线抖动非常厉害。
特来请教一下各位,有没有人做过,用什么柱子比较好?抑或问题可能出在哪里?该如何解决比较好妥当?
在此谢过各位!