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小鼠的肝脏(脂肪肝模型)储存后切片会碎掉或者出现空白间隙,是脂滴溢出了?还是我造模根本就没成?

六月多的时候采集小鼠的肝脏(脂肪肝模型)。一部分直接OCT包埋,放在-20凝固以后放在-80,过了两个月以后拿出来,做冰冻切片的时候一切组织就碎了,OCT切出来的时候是正常的像白纸但是切到组织就碎了,就像粉末似的。然后还有一部分直接液氮速冻以后放到-80了。我把速冻的肝脏室温融化后固定,蔗糖梯度脱水,切的时候就不碎了,可是问题又来了,切完我放到镜下就看到很多的间隙(如图所示)。请问这是出了什么问题,是脂滴溢出了?还是我造模根本就没成?


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共2个回答
看你说已经冻在-80好久了,已经冻了那就没办法了,在肝脏内部冰晶已经形成,并且已经刺伤组织细胞了   
片子上很多空洞, 是组织内的水在低温下形成冰晶造成的。做冰冻片最好先脱水了再放低温

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