引言:
Giemsa染色法是一种常用的生物学染色技术,广泛应用于细胞学和组织学领域。通过这种染色方法,可以有效地对细胞和组织中的结构进行染色,从而帮助研究人员观察和分析它们的形态和特征。
简介:
Gustav Giemsa于 1867 年出生于德国,主要从事化学工作,1948 年去世。以他的名字命名的Giemsa染色法(吉姆萨染色)主要用于展示疟疾中的寄生虫,但由于染色质和核膜的高质量染色、某些细胞成分的异染性以及细胞质染色质量因细胞类型而异,因此也用于组织学。使用亚甲天青及其与亚甲蓝的混合物形成曙红酸盐可以使染色及其结果稳定。吉姆萨染色被认为是世界上疟疾疟原虫的标准诊断技术,也是基尔分类中对淋巴瘤进行分类的基本染色。
1. 吉姆萨染色剂的用途是什么?
吉姆萨染色剂得名于一位德国化学家,因为他应用了多种试剂来证明疟疾寄生虫的存在。它属于一组称为罗曼诺夫斯基染色剂的染色剂。这些中性染色剂由氧化亚甲蓝、天青和伊红 Y 的混合物组成,它们在用甲醇固定的空气干燥载玻片上进行。罗曼诺夫斯基染色剂用于细胞分化、血液和骨髓膜等样本的病理检查以及疟疾等寄生虫的展示。
2. 吉姆萨染色程序
(1)Giemsa Stain 溶液的制备。将 3.8 克Giemsa 粉末加入 250 毫升甲醇中溶解,加热至 60℃。然后,慢慢将 250 毫升甘油加入溶液中。过滤溶液,静置约 1-2 个月后使用。
(2)准备工作溶液。将10ml储备溶液加入80ml蒸馏水和10ml甲醇中。
(3)在干净干燥的显微镜载玻片上,将标本制成薄片,然后风干。
(4)将涂片(2-3 次浸泡)浸入纯甲醇中以固定涂片,风干 30 秒。
(5)用 5% Giemsa 染色剂溶液淹没载玻片 20-30 分钟。
(6)用自来水冲洗并晾干。
(7)加入厚厚的血迹,在染色架上风干 1 小时。
(8)将浓稠的血涂片浸入稀释的Giemsa染色剂中(取 1ml 原液,加入 49ml 磷酸盐缓冲液或蒸馏水中,但结果可能有所不同)。
(8)将涂抹物浸入蒸馏水的缓冲水中 3-5 分钟。晾干。
3. 解释吉姆萨染色结果
吉姆萨染色阳性是什么颜色?吉姆萨染色是一种用于细胞遗传学和疟疾和其他寄生虫组织病理学诊断的核酸染色剂:
(1)血细胞的细胞质和细胞质颗粒呈红色,而细胞核呈蓝紫色。
(2)红细胞在鳞片中呈粉红色。
(3)嗜酸性粒细胞将具有蓝紫色细胞核、淡粉色细胞质和橙红色颗粒。
(4)中性粒细胞将出现紫红色的细胞核和粉红色的细胞质。
(5)嗜碱性粒细胞将具有紫色细胞核和蓝色颗粒。
(6)淋巴细胞具有深蓝色的细胞核和浅蓝色的细胞质。
(7)单核细胞将有一个紫色的细胞核和一个粉红色的细胞质。
(8)血小板会有紫色颗粒。
用 Giemsa 染色的旋转病切片如下:
4. 吉姆萨染色的优点和局限性
(1)优点
随时可用,易于制备、维护和使用。
(2)局限性
工作吉姆萨染色剂必须在使用前不久制备。
5. 吉姆萨染色的安全性和处理
(1)安全指南
吉姆萨染色剂是一种常见的实验室染色剂,由于其潜在的健康危害,需要小心处理。处理时,务必佩戴个人防护设备,如手套、护目镜和实验室工作服。避免吸入烟雾或直接接触皮肤和眼睛。确保工作场所通风良好。将吉姆萨染色剂存放在密封容器中,远离热源、光源和火源。根据当地危险品法规处理废物。
(2)急救措施
如果吉姆萨染色剂接触到您的皮肤,请用肥皂和水彻底清洗受影响的区域。如果接触到眼睛,请睁开眼睑,用水冲洗至少 15 分钟。如果吸入,请将患者移至新鲜空气处,并在必要时就医。如果吞食,请勿催吐。用水漱口并立即就医或就毒物控制中心。请记住随时准备好吉姆萨染色剂的安全数据表 (SDS),以获取详细的急救说明。
6. 结论
Giemsa染色技术在生物学研究中扮演着重要角色,为科学家们提供了一种可靠的方法来观察和分析细胞和组织的结构。通过这种简单而有效的染色方法,我们能够更深入地理解生物体内部的微观世界,并在医学诊断和科学研究中取得进步。因此,Giemsa染色在不同领域的广泛应用将继续推动生命科学的发展。”
参考:
[1]https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17652540/
[2]https://www.creative-bioarray.com/support/giemsa-staining-protocol.htm
[3]https://microbenotes.com/giemsa-stain-principle-procedure-results-interpretation/
[4]https://en.wikipedia.org/wiki/Giemsa_stain
[5]https://www.edvotek.com/